hrvatski

Utjecaj UV zračenja na embrionalne stanice miša

Indukcija apoptoze UV svjetlom predstavlja model za proučavanje kontrolnih mehanizama u stanci kojima se ona štiti od trajnog oštećenja DNA. UV zračenje oštećuje DNA molekulu i aktivira vanjski i unutrašnji (mitohondrijski) signalni put apoptoze. Vanjski put uključuje receptore na površini membrane stanice i adapterske molekule kao što je FADD (Fas povezani protein sa smrtonosnom domenom) koji provode signale u unutrašnjost stanice. Ispitana je indukcija apoptoze u ovisnosti o dozi UV zračenja i vremenu inkubacije nakon zračenja koristeći se embrionalnim mišjim fibroblastima dobivenim iz „knock-out“ miševa. Morfološke promjene praćene su korištenjem DNA vezujućih boja i elektronskim mikroskopom, a biokemijske protočnim citometrom i imunodetekcijom cijepanja proteina poli –(ADP-riboze) polimeraze (PARP) kao jednog od najranijih pokazatelja apotptotičnih promjena u stanici . Morfološke i biokemijske promjene praćene su u funkciji vremena nakon zračenja UV svjetlom. Pokazalo se da je apototični odgovor u FADD +/+ i FADD -/- staničnim linijama različit te da ovisi o dozi i vremenu inkubacije nakon zračenja. Cijepanje PARP-a različito je pri dozi od 50 J/m2 nakon 24 sata u FADD+/+ i FADD -/- što govori o aktiviranju unutrašnjeg signalnog puta u FADD-/- staničnoj liniji.

apoptoza; FADD; UV zračenje; PARP; Western blot

nije evidentirano