hrvatski

HUMORALNI IMUNOSNI ODGOVOR JELENA OBIČNOG (CERVUS ELAPHUS) PRIRODNO INVADIRANOG VELIKIM AMERIČKIM METILJEM

Cilj ovog doktorskog rada bio je istražiti humoralni imunosni odgovor prirodno invadiranih jelena običnih s velikim američkim metiljem (Fascioloides magna) na ekskretorno/sekretorni antigen koji je dobiven od vitalnih metilja F. magna (Fm-E/SAg) korištenjem imunoenzimnog (ELISA) i immunobloting testa. Ekskretorno/sekretorni antigen Fasciola hepatica (Fh-E/SAg) korišten je za dokazivanje križne-reaktivnosti s protutijelima iz istraživanih seruma. Za svaku invadiranu ili neinvadiranu životinju utvrđena je: aktivnost serumskih enzima jetre, koncentracija proteina, uree i glukoze u serumu, broj jajašaca metilja u izmetu, broj i zrelost metilja, te prisustvo različitih patoloških promjena u jetri prema unaprijed određenoj klasifikaciji. Rezultati ELISA testa s ciljem određivanja protutijela protiv metilja F. magna analizirane su pomoću ROC analize. Za potrebe analize ukupno je korišteno 38 uzoraka seruma od jelena običnih epizootiološkog područja pojave fascioloidoze u čijim je jetrama dokazana prisutnost vitalnih metilja čime se utjecalo na osjetljivosti testa. Drugih 10 uzoraka seruma prikupljeno je od jelena običnih izvan epizootiološkog područja čime se utjecalo na specifičnost testa. Istraživanjem je dokazana visoka dijagnostička točnost testa s obzirom da je indeks površina ispod krivulje (AUC) iznosio 0.96, uz napomenu da su serumi potjecali od životinja negativnih na invaziju metiljem F. hepatica. Granična vrijednost testa dobivena je analizom dvostrane krivulje primatelja operativnih karakteristika (TG-ROC). Osjetljivost, specifičnost, efikasnost i Youdenov indeks, korišteni su kao indeksi točnosti testa. U istraživanju je dokazana križna reaktivnost između protutijela stvorenih protiv metilja F. magna i ekskretorno/sekretornih antigena oba metilja. Immunoblotting testom korištenjem Fm-E/SAg, dokazana je reakcija šest (6, 17, 22, 27, 40 i 45 kDa), odnosno korištenjem Fh-E/SAg dva (31-33 i 93 kDa) proteinska bendova s protutijelima iz seruma jelena običnih prirodno invadiranih metiljem F. magna. Značajno niža (P<0, 05) aktivnost serumskih enzima (alanin transaminaza, laktat dehidrogenaza i glutamat dehidrogenaza) i vrijednosti globulina, uočene su u jelena običnih invadiranih metiljem F. magna, dok su odnos albumin / globulin, vrijednosti albumina i glukoze značajno više (P<0, 05) nego kod jelena običnih slobodnih na invaziju metiljem F. magna. Rezultati pokazuju da ELISA i immunobloting test, te vrijednosti pojedinih biokemijskih pokazatelja mogu itekako biti korisne s ciljem ranog otkrivanja fascioloidoze u jelena običnog, te isto tako u njenom suzbijanju u slobodno živućoj populaciji.

humoralni imunosni odgovor; jelen obični; veliki američki metilj; Fascioloides magna; imunoenzimni test; imunobloting test; biokemijski pokazatelji

nije evidentirano