engleski

MICROBIOLOGICAL ASSAY OF OXYTETRACYCLINE AND VALIDATION OF THE METHOD

Cilj rada bio je provesti mikrobiološko određivanje aktivnosti oksitetraciklina u masti i validirati korištenu metodu kako bi se utvrdila njezina prikladnost za analitičku primjenu. Određivanje aktivnosti oksitetraciklina provedeno je mikrobiološkom metodom difuzije na krutoj hranjivoj podlozi, s dvije koncentracije standarda i dvije koncentracije uzorka, uz Bacillus pumilus NCTC 8241 kao test-mikroorganizam. Statističkom obradom izmjerenih promjera zona inhibicija na širokoj ploči, dobivena je aktivnost oksitetraciklina izražena u mg oksitetraciklina/g masti.Kao kriterij za validaciju metode odabrani su i ispitani slijedeći parametri: ponovljivost pripreme uzorka, ponovljivost mjerenja, reproducibilnost, točnost i selektivnost te su, nakon prikladne statističke obrade dobivenih vrijednosti aktivnosti oksitetraciklina, rezultati izraženi kao relativna standardna devijacija (RSD). U radu je definiran i pojam antibiotika, uz kratak osvrt na povijest razvoja antibiotika, opisani su mehanizmi djelovanja i rezistencija antibiotika te mikrobiološke metode određivanja njihove aktivnosti. Rezultat određivanja aktivnosti oksitetraciklina pokazao je da 1g masti sadrži 32, 5 mg oksitetraciklina. Ispitivanjem parametara koji su odabrani kao kriterij za validaciju dobiveni su zadovoljavajući rezultati (za ponovljivost pripreme uzorka RSD=2, 4%, za ponovljivost mjerenja RSD=1, 2%, za reproducibilnost RSD=2, 9%, za točnost RSD=1, 4%, a ispitivanjem selektivnosti utvrđeno je da je metoda specifična za određivanje oksitetraciklina u masti). Na temelju tih rezultata zaključeno je da je metoda validirana, tj. da je njome moguće trajno dobivati pouzdane podatke.

Antibiotics; microbiological assay; method of diffusion; validation

nije evidentirano