hrvatski

Detekcija interferona gama primjenom Quantiferon-TB Gold testa

Uvod: Quantiferonski test (QuantiFERON-TB-GOLD In-Tube Method ; Cellestis Ltd., Carnegie, Victoria, Australia) je in vitro dijagnostički test namijenjen utvrđivanju stanične imunoreaktivnosti na Mycobacterium tuberculosis. Testom se kvantitativno određuje oslobađanje interferona gama - IFN- iz senzibiliziranih limfocita nakon inkubacije uzoraka pune krvi bolesnika sa sintetičkim peptidima – proteinima vrste Mycobacterium tuberculosis, (Early-Secreted Antigenic Target 6-kDa protein - ESAT-6, Culture filtrate protein 10 - CFP-10). Ovi antigeni su produkti RD1 regije genoma koja je prisutna u svih sojeva Mycobacterium tuberculosis i patogenih sojeva Mycobacterium bovis ali je ne posjeduju BCG sojevi i većina atipičnih mikobakterija. Koncentracija IFN- određuje se u plazmi izdvojenoj nakon šesnaest do dvadesetčetiri satne inkubacije pomoću imunoenzimskog testa. Test je prije svega namijenjen za dijagnostiku latentne tuberkuloze u pacijenata s povećanim rizikom za razvoj aktivnog oblika infekcije. Quantifernski test se može koristiti kod svih indikacija za izvođenje tuberkulinskog - kožnog testa preosjetljivosti uključujući ispitivanje kontakata oboljelih, imigranata iz područja s visokom učestalošću tuberkuloze i BCG vakcinacijom, te provjeru zdravstvenog osoblja. Neophodna je evaluacija dobivenih rezultata u usporedbi s istovremeno izvršenim radiografskim i mikrobiološkim - kultivacijskim pretragama. Materijali i metode: Puna krv bolesnika je prikupljana venepunkcijom pomoću komercijalnih sistema (BD Diagnostics ; Becton, Dickinson and Company) u količini od 0, 8 do 1, 2 ml po epruveti. Izvođenje testa započeto je, sukladno preporukama proizvođača, unutar 12 sati po izvršenoj venepunkciji. U prvoj fazi izvođenja testa, puna krv bolesnika inkubirana je zajedno sa stimulirajućim antigenima na 37oC kroz 16 do 24 sata. Potom je u izdvojenoj plazmi utvrđivana koncentracije IFN-γ pomoću imunoenzimskog testa. Optička gustoća određivana je spektofotometrijski uporabom Tecan Sunrise čitača absorbancije (Tecan Austria GmbH), a vrijednosti s ELISA čitača interpretirane su pomoću komercijalnog programa QuantiFERON – TB GOLD Analysis Software (Cellestis, Inc. Valencia, CA). Rezultati IFN-γ testiranja određeni su prema preporuci proizvođača (Product Package Insert, QuantiFERON-TB GOLD In Tube results ; Cellestis, Ltd.). Svi ispitivani uzorci pohranjeni su na – 20oC. Rezultati: Na Mikrobiološkom odjelu u Nastavnom zavodu za javno zdravstvo, u razdoblju od 01.06.2007. do 01.04.2009. obrađeno je 286 uzoraka, od kojih je 195 negativnih, 64 pozitivnih i 9 neodređenih.

interferon gama; latentna tuberkuloza; detekcija

nije evidentirano