hrvatski

Candida albicans: strategije “ unutrašnjeg neprijatelja”

Kandidoza je učestala infekcija kože i sluznica čovjeka. U oslabljelih i pacijenata s kompromitiranim imunološkim sustavom, fungemija uzrokovana s vrstama roda Candida je za život opasna infekcija. Najčešća vrsta koja uzrokuje mikoze je C. albicans (CA), no epidemiološke studije bilježe povećanu učestalost infekcija uzrokovanih ne-albicans vrstama kandida. CA posjeduje nekoliko virulentnih čimbenika koji doprinose patogenezi. Cilje ovog rada jest ukazati na novu ulogu nisko-molekularnih metabolita (NMM) koje tvori CA i njihovu moguću ulogu tijekom kandidoze. U našim novijim istraživanja utvrdili smo CA tvori NMM tijekom eksponencijalnog rasta u sintetskom mediju, s ili bez 5% CO2 ili fetalnog goveđeg seruma, kao induktora dimorfizma. Primjenom tekućinske kromatografije sa spektrometrom masa, identificirali smo triptofol (3-indol-etenol, TOL) kao jedini NMM izmeđi ispitivanih sojeva CA. Tvorba TOL-a nije bila značajna između izolata s obzirom na mjesto izolacije, komenzalizam ili sojeve izolirane iz klinički manifestne kandidoze kao niti uz prisustvo okidača dimorfizma (serum). Atmosfera s 5% CO2 značajno smanjuje tvorbu TOL-a. Također smo proveli nekoliko pokusa u in vitro uvjetima kako bi razrješili genotoksični profil TOL-a u kulturi ljudskih limfocita (ex situ) te epitelnih stanica (linija A549, CHO, COS-7). Primjenom nekoliko testova (alkalnog kometnog testa, analize razmjene sestrinjskih kromatida, mikronukles testa te kromoskomskih aberacija) ispitali smo primarna oštećenja DNA i citogenetske posljedice u genomu tretiranih stanica s TOL-om. Uz to, ispitiali smo i staničnu vijabilnost s naglaskom na mjerenje indukcije apoptoze i nekroze. Dobiveni rezultati govore o citotoksičnom, citostatičnom i genotoksičnom učinku triptofola u staničnim kulturama u uvjetima in vitro koji su bili uglavnom ovisni o dozi (od 0, 25 mM fo 2 mM) (1, 2, 3). TOL inducira apoptozu u limfocitima i utvrđeno je da TOL-induciran apoptoza uključuju aktivaciju kaspaza-8 i kaspaza-3, uz cijepanje poli(ADP-riboze)polimeraze (4). Interesantno, u citotoksičnim i genotoksičnim koncentarcijama, TOL nema učinka na vijabilnost, ali ima učinak na prijelaz CA u filamentozni oblik rasta (kao jednog od činitelja virulencije CA), kao i tvorbu biofilma (5). Kao lipofilni alkohol TOL se metabolizira pomoću alkohol-dehidrogenaze (prisutne u većini stranica, a i u CA) u 3-indol-acetaldehid, a za acetaldehide su poznati mutageni, karcinogeni i genotoksični učinci. Nadalje, tvorba toksičnog acetaldehida mikrobne mikroflore sluznica i kože je postavljena kao nova teorija karcinogeneze (6). Zbog toga što je CA dio normalne komenzalne mikroflore sluznica, posebice se želi naglasiti toksični učinak TOL-a i/ili acetaldehida tijekom kandidize. TOL je citotoksični/citostatični i genotoskični metabolit CA. Daljnjim istraživanja tvorbe TOL-a u uvjetima in vivo nadamo se rasvjetljavanju pitanja proizlaših ovim istraživanjima.

kandidoza; triptofol; genotoksičnost

nije evidentirano

engleski

Candida albicans: Strategy of an internal enemy

Kandidoza je učestala infekcija kože i sluznica čovjeka. U oslabljelih i pacijenata s kompromitiranim imunološkim sustavom, fungemija uzrokovana s vrstama roda Candida je za život opasna infekcija. Najčešća vrsta koja uzrokuje mikoze je C. albicans (CA), no epidemiološke studije bilježe povećanu učestalost infekcija uzrokovanih ne-albicans vrstama kandida. CA posjeduje nekoliko virulentnih čimbenika koji doprinose patogenezi. Cilje ovog rada jest ukazati na novu ulogu nisko-molekularnih metabolita (NMM) koje tvori CA i njihovu moguću ulogu tijekom kandidoze. U našim novijim istraživanja utvrdili smo CA tvori NMM tijekom eksponencijalnog rasta u sintetskom mediju, s ili bez 5% CO2 ili fetalnog goveđeg seruma, kao induktora dimorfizma. Primjenom tekućinske kromatografije sa spektrometrom masa, identificirali smo triptofol (3-indol-etenol, TOL) kao jedini NMM izmeđi ispitivanih sojeva CA. Tvorba TOL-a nije bila značajna između izolata s obzirom na mjesto izolacije, komenzalizam ili sojeve izolirane iz klinički manifestne kandidoze kao niti uz prisustvo okidača dimorfizma (serum). Atmosfera s 5% CO2 značajno smanjuje tvorbu TOL-a. Također smo proveli nekoliko pokusa u in vitro uvjetima kako bi razrješili genotoksični profil TOL-a u kulturi ljudskih limfocita (ex situ) te epitelnih stanica (linija A549, CHO, COS-7). Primjenom nekoliko testova (alkalnog kometnog testa, analize razmjene sestrinjskih kromatida, mikronukles testa te kromoskomskih aberacija) ispitali smo primarna oštećenja DNA i citogenetske posljedice u genomu tretiranih stanica s TOL-om. Uz to, ispitiali smo i staničnu vijabilnost s naglaskom na mjerenje indukcije apoptoze i nekroze. Dobiveni rezultati govore o citotoksičnom, citostatičnom i genotoksičnom učinku triptofola u staničnim kulturama u uvjetima in vitro koji su bili uglavnom ovisni o dozi (od 0, 25 mM fo 2 mM) (1, 2, 3). TOL inducira apoptozu u limfocitima i utvrđeno je da TOL-induciran apoptoza uključuju aktivaciju kaspaza-8 i kaspaza-3, uz cijepanje poli(ADP-riboze)polimeraze (4). Interesantno, u citotoksičnim i genotoksičnim koncentarcijama, TOL nema učinka na vijabilnost, ali ima učinak na prijelaz CA u filamentozni oblik rasta (kao jednog od činitelja virulencije CA), kao i tvorbu biofilma (5). Kao lipofilni alkohol TOL se metabolizira pomoću alkohol-dehidrogenaze (prisutne u većini stranica, a i u CA) u 3-indol-acetaldehid, a za acetaldehide su poznati mutageni, karcinogeni i genotoksični učinci. Nadalje, tvorba toksičnog acetaldehida mikrobne mikroflore sluznica i kože je postavljena kao nova teorija karcinogeneze (6). Zbog toga što je CA dio normalne komenzalne mikroflore sluznica, posebice se želi naglasiti toksični učinak TOL-a i/ili acetaldehida tijekom kandidize. TOL je citotoksični/citostatični i genotoskični metabolit CA. Daljnjim istraživanja tvorbe TOL-a u uvjetima in vivo nadamo se rasvjetljavanju pitanja proizlaših ovim istraživanjima.

candidiasis; tryptophol; genotoxicity

nije evidentirano