hrvatski

Svojstva i djelovanje liposoma s ugrađenim proteinima i deoksiribonukleinskim kiselinama

Liposomi se sastoje od jednog ili više fosfolipidnih dvosloja koji okružuju vodeni medij, a koriste se za dostavu biološki aktivnih molekula. U ovom radu ispitana su svojstva i djelovanje liposoma kao nosača antigena ovalbumina. Istraženo je i kako fizikalno-kemijska svojstva određuju transfekcijsku učinkovitost kationskih liposoma korištenjem plazmidne DNA koja kodira zeleni fluorescentni protein odnosno protein virusa mumpsa. Učinkovitost ugrađivanja ovalbumina u liposome određena je tekućinskom kromatografijom visoke djelotvornosti. Povećanje ionske jakosti smanjuje učinkovitost ugrađivanja ovalbumina u kationske liposome dok u slučaju anionskih liposoma nema utjecaj. Pozitivna korelacija količine ugrađenog proteina u liposomima na veličinu liposoma nađena je samo u primjeru kationskih liposoma u puferu male ionske jakosti. Povećanje količine ovalbumina u liposomima nije izazvalo promjenu u naboju liposoma. EPR spektroskopijom pokazano je postojanje interakcije između spinski obilježenog ovalbumina i liposoma. Enzimskim imunotestom (ELISA) ispitano je imunostimulatorno djelovanje formulacija liposoma in vivo određivanjem razine antitijela te je pokazano da se povećanjem količine antigena ugrađenog u liposome imunoreakcija usmjerava prema staničnoj imunosti. Određeno je da prisustvo dioleoilfosfatidilkolina, koji pokazuje svojstvo fuzioniranja s membranama, u liposomskim formulacijama također usmjerava imunoreakciju prema staničnoj imunosti bez obzira na naboj liposoma. U drugom dijelu istražen je utjecaj fizikalno kemijskih svojstava kationskih liposoma na transfekciju stanica te je djelovanje najboljih formulacija ispitano in vivo. Testiranjem liposomskih formulacija na tri stanične linije utvrđeno je da se učinkovitost transfekcije razlikuje ovisno o tipu stanice. Određeno je da je glavni faktor utjecaja na transfekcijsku učinkovitost liposoma in vitro gustoća pozitivnog naboja odnosno ukupni naboj kompleksa DNA i liposoma čijim povećanjem se povećava i transfekcijska učinkovitost.

adjuvanti ; dostava lijekova ; genska cjepiva ; liposomi ; ovalbumin ; učinkovitost transfekcije ; učinkovitost ugrađivanja

nije evidentirano