hrvatski

Razvoj goveđih zametaka in vitro polučenih iz folikula u različitim stadijima spolnog ciklusa

Cilj našeg istraživanja bio je istražiti utjecaj faze spolnog ciklusa i promjera folikula na razvojnu sposobnost polučenih jajnih stanica u postupku dozrijevanja oplodnje in vitro. Iz 70 jajnika zaklanih krava simentaske pasmine aspirirali smo ukupno 1.682 folikula promjera do 8 mm tijekom ljetnog razdoblja (lipanj i srpanj). Na osnovi morfološke ocjene, parove jajnika smo razvrstali u 3 različite faze spolnog ciklusa, a folikule u dvije kategorije (> od 3 mm i < od 3 mm). Pregledom aspirirane tekućine pronašli smo 737 jajnih stanica, od kojih 475 u kategoriji manjih od 3 mm, a 262 u kategoriji većih od 3 mm. Uspjeh aspiracije iznosio je 43, 8%. Dobivene nezrele jajne stanice morfološki smo ocjenili i svrstali u 3 kategorije, od kojih su u postupak dozrijevanja ušle samo jajne stanice I i II kategorije („ dobre“ jajne stanice). Odabrane jajne stanice stavili smo u medij za dozrijevanje te ih nakon inkubacije od 24 sata oplodili duboko smrznutom spermom bika pripremljenoj na gradijentu Percoll® ; . Drugog dana nakon oplodnje utvrdili smo postotak brazdanja od 50, 6%. Dobivene zametke smo uzgajali u definiranom mediju SOFaaBSA do stadija morula i blastocista. Nakon 7. dana uzgoja dobili smo 59 (15, 8%) morula i blastocista, a 11. dana 37 (9, 9%) blastocista i 22 (5, 9%) izlijeganih blastocista koje smo klasificirali po IETS standardima. Nismo ustanovili značajnu razliku u sposobnosti uspjeha dozrijevanja, oplodnje i uzgoja jajnih stanica među različitim fazama spolnog ciklusa niti među kategorijama folikula. Budući da su Makek i sur. (2000.) u proljetnom razdoblju, uz iste uvjete uzgoja te po istom protokolu rada u istom laboratoriju, dobili veći broj trasferbilinih zametaka, možemo pretpostaviti da je na dobivene rezultate utjecala sezona (ljeto) u kojoj su provedena istraživanja.

govedo; folikul; oocita; embrionalni razvoj

nije evidentirano