First insight into catalytic and cofactor binding site of novel aminoglycoside resistance methyltransferase NpmA (CROSBI ID 544060)
Prilog sa skupa u zborniku | sažetak izlaganja sa skupa | domaća recenzija
Podaci o odgovornosti
Babić, Fedora ; Čubrilo, Sonja ; Maravić Vlahoviček, Gordana
engleski
First insight into catalytic and cofactor binding site of novel aminoglycoside resistance methyltransferase NpmA
Mehanizam djelovanja nekih antibiotika je inhibicija sinteze proteina vezanjem na funkcijski važna mjesta ribosoma. Bakterije koje proizvode antibiotike kao i sve veći broj kliničkih sojeva posjeduju različite rRNA metil-transferaze koje metilacijom specifičnog nukleotida na rRNA onemogućuju vezanje antibiotika. Sve učestalija rezistencija na aminoglikozidne antibiotike uzrokovana je djelovanjem metil-transferaza iz porodica Arm i Kam. U kliničkim sojevima E. coli rezistentnim na aminoglikozide pronađen je novi enzim NpmA. NpmA je N-1 metil-transferaza iz porodice Kam koja metilira adenin na položaju A1408 unutar A mjesta u maloj podjedinici ribosoma. Svrha našeg rada je funkcijska karakterizacija metil-transferaze NpmA. Gen za metil-transferazu NpmA kloniran je u pET-25b (+) vektor i ciljanom mutagenezom izmijenjena su evolucijski očuvana mjesta. Stanice E. coli inače osjetljive na antibiotike transformirane su rekombinantnim vektorom te je in vivo testom utvrđena minimalna inhibitorna koncentracija za kanamicin i gentamicin. Usporedbom rezultata mutanata i divljeg tipa možemo pretpostaviti gdje se nalaze funkcijski važna mjesta enzima kao i mjesto vezanja kofaktora S-adenozil-metionina. U tijeku su podrobnija kinetička ispitivanja koja će omogućiti razumijevanje mehanizma djelovanja NpmA i stvoriti temelj za pronalazak prikladnog inhibitora koji bi zaustavio ovaj novi tip rezistencije na aminoglikozide.
aminoglycoside antibiotics; microbial resistance; rRNA methylation; NpmA methyltransferase
nije evidentirano
nije evidentirano
nije evidentirano
nije evidentirano
nije evidentirano
nije evidentirano
Podaci o prilogu
44-x.
2008.
objavljeno
Podaci o matičnoj publikaciji
Zbornik sažetaka
Zahradka, Ksenija ; Plohl, Miroslav ; Ambriović-Ristov, Andreja
Zagreb: Institut Ruđer Bošković
978-953-6690-78-7
Podaci o skupu
Znanstveni simpozij 50 godina molekularne biologije u Hrvatskoj
poster
20.11.2008-21.11.2008
Zagreb, Hrvatska