hrvatski

Aktivnost i izoforme esteraze povezane sa staničnom diferencijacijom u kulturi tkiva hrena Armoracia lapathifolia Gilib.

Biljka hrena (Armoracia lapathifolia Gilib.) propagirana je u uvjetima in vitro. Tumor vrata korijena induciran je na fragmentima lista divljim oktopinskim sojem B6S3 bakterije A. tumefaciens. Uspostavljene su dvije linije transformiranog tkiva: neorganizirana tumorska linija (TN) i teratomska linija (TM), koja razvija izdanke zadebljalih listova. U listu hrena, teratoma i tumorskog tkiva analizirani su izoenzimi esteraza. Izoenzimi su razdvojeni elektroforetski u poliakrilamidnim gradijent gelovima (8-18 %) te izoelektričnim fokusiranjem (pH 3-9). Za prikaz izoenzima korištena su dva supstrata, 1- i 2-naftilacetat. Poliakrilamidnom gel-elektroforezom razdvojeno je ukupno 9 izoesteraza koje su detektirane primjenom oba supstrata istovremeno. Većina izoesteraza bila je zajednička za sva tkiva. Međutim, izoforma E1 bila je prisutna samo u tumorskom tkivu dok je izoforma E3 nedostajala u listu. Izoesteraza E7 bila je prisutna u svim tkivima iako je intenzitet obojenja bio najveći u tumorskom tkivu. Izoforme E5 i E6 reagirale su samo s 1-naftilacetatom, dok je izoesteraza E9 reagirala samo s 2-naftilacetatom. Sličan rezultat dobiven je i izoelektričnim fokusiranjem. Nadalje, korišten je još jedan supstrat esteraza, p-nitrofenil butirat. Samo bazične esteraze pokazale su aktivnost prema ovom supstratu. U cilju karakterizacije esteraza hrena koje su povezane sa staničnom diferencijacijom, započet je postupak razdvajanja enzima, s kromatografijom kationske izmjene kao prvim korakom.

izoesteraze; stanična diferencijacija; kultura tkiva

nije evidentirano