hrvatski

Utvrđivanje i mjerenje apoptoze fluorescencijskim mikroskopom

Kombinacija aneksina-V-fluorescein i propidij jodida (PI) omogućava razlikovanje stanica u ranoj apoptozi i nekrotičnih stanica od živih stanica. Jedna od promjena u ranoj apoptozi je premještanje fosfatidilserina s unutrašnjeg na vanjski dio membrane. U tim okolnostima može ga se detektirati jer postaje izložen na površini stanice. Aneksin V je protein veličine 35-36 kDa koji se jakim afinitetom veže za fosfatidilserin. I nekrotičnim je stanicama na površini izložen fosfatidil serin. Da bi ih razlikovali od apoptotskih, stanice istovremeno bojimo i propidij jodidom, koji zaostaje samo u mrtvim, nekrotičnim stanicama i one fluoresciraju crveno. Budući da je premiještanje fosfatidilserina jedan od prvih događaja u apoptotskoj stanici, metode koje se temelje na vezanju aneksina V za fosfatidilserin detektiraju apoptozu ranije nego metode koje mjere DNA fragmentaciju ili aktivaciju kaspaza.

aneksin-V-fluorescein, propidij jodid

nije evidentirano