hrvatski

Uklapanje u parafin

1. Nakon prethodne fiksacije i dehidracije tkivo se obično nalazi u tzv. intermediju. Najčešće se u tu svrhu koristi ksilol. Tkivo se mora prožeti intermedijem sve dok ne padne na dno posude odnosno ne postane prozirno3. 2. Uzorak tkiva prebaciti u posudicu s mješavinom ksilola i parafina (1:1) (termostat, 56° C 10 min.)4. 3. Tkivo staviti u posudicu s parafinom. Nakon sat vremena, tkivo prebaciti u svježi parafin. Parafin u kojem je prethodno bilo tkivo se filtrira ili, ovisno o čistoći i konzistenciji, više ne rabi. Ponoviti postupak nakon sat vremena (ukupno 3 svježa parafina, svaki po sat vremena, sve u termostatu koji osigurava da parafin bude tekuć). 4. Uklopiti tkivo. U tu svrhu koristi se embrio posudica prethodno namazana parafinskim uljem na sobnoj temperaturi. Uliti u posudicu tekući profiltrirani ili svježi parafin. Izvaditi tkivo iz termostata (iz posudice s parafinom u kojem je tkivo) te tkivo uroniti u embrio posudicu5. 5. Tkivo postaviti u središte embrio šalice pomoću prethodno lagano zagrijane anatomske pincete (koristiti plamenik). Dodatno se položaj može ispraviti korištenjem iglice ili/i pincete. 6. Embrio posudicu zajedno s parafinom staviti u bazen s vodovodnom hladnom vodom. Blok se tom prilikom (zbog stvrdnuća parafina) često sam odvoji od stijenke embrio posudice. U protivnom slučaju, lagano istisnuti blok iz udubljenog dijela embrio posudice. 7. Osušiti blok pamučnom krpom (glatke površine). 8. Oblikovati blok koristeći skalpel (opasnost od povrede!). Izrezati što je moguće veći suvišak parafina i formirati 4-stranu piramidu bez vrha. 9. Postaviti blok na drveni podložak. U tu svrhu na podložak nakapati malo tekućeg parafina i odmah potom postaviti prethodno oblikovani blok. Uroniti u bazen s hladnom vodovodnom vodom kako bi se parafin što prije stvrdnuo. 10. Pohraniti blok (najbolje na 4° C, osobito ako se planiraju imunohistokemijske reakcije). Uoči rezanja također je poželjno blok staviti na par sati u hladnjak na 4° C.

tkivo, uklapanje, parafin

nije evidentirano