hrvatski

Imunodetekcija proteina na membrani

Nakon prijenosa proteina na membranu, traženi se protein detektira pomoću antitijela. Primarna protutijela moraju biti visoko specifična za traženi protein. Na primarna se protutijela vežu sekundarna koja su u kompleksu s enzimom. Ovaj enzim omogućuje vidljivost signala i određuje način detekcije. Najčešće korišteni enzimi su alkalna fosfataza i peroksidaza iz hrena, a rabe se za kolorimetrijsku ili kemiluminiscencijsku reakciju. Dodavanjem kromogenog supstrata alkalnoj fosfatazi ili peroksidazi dolazi do enzimske reakcije čiji je produkt obojeni talog na mjestu vezanja protutijela. Dodavanjem kemiluminiscencijskog supstrata alkalnoj fosfatazi ili peroksidazi iz hrena dolazi do emisije svjetla na onim mjestima gdje se nalaze sekundarna protutijela, a nakon što se membrana prisloni na film ta se mjesta vide kao zatamnjene pruge.

proteini, imunodetekcija

nije evidentirano