hrvatski

AFINITETNA KROMATOGRAFIJA NA NOSAČU S IMOBILIZIRANIM METALOM (IMAC)

Rekombinantni proteini koji sadrže niz od 6 histidinskih ostataka (engl. hexa histidine-tag, 6xHis-tag) mogu se proizvesti koristeći različite sustave za ekspresiju u različitim domačinima, npr. u kulturi stanica (vidi poglavlje 10.2.3.3.) ili u različitim rodovima bakterija (vidi poglavlje 1.1.). Ovako sintetizirani proteini mogu se pročistiti u jednom koraku, uz pomoć afinitetne kromatografije na nosaču (NTA-agaroza ; NTA=nitrilo-trioctena kiselina) s vezanim ionima nikla, koji pokazuje izvanrednu selektivnost baš za proteine s His6 strukturnim motivom. Kompeticija između imidazola iz pufera za eluciju i imidazolnog prstena histidinskih ostataka proteina za ione nikla omogućuje odvajanje rekombinantog proteina od afinitetnog nosača. Na taj način rekombinanti proteini mogu biti učinkovito pročišćeni.

Ni-NTA agaroza, afinitetna kromatografija, imidazol

nije evidentirano