hrvatski

Identifikacija čimbenika i potencijalnih inhibitora virulencije bakterije Pseudomonas aeruginosa fenotipskom analizom kvasca

Sažetak: Bakterija Pseudomonas aeruginosa je oportunistički patogen u ljudi, visoko rezistentna na mnoge antimikrobne agense i može razviti visok stupanj višestruke rezistencije na antibiotike, zbog čega se javila potreba za otkrivanjem novih metoda pronalaska ciljnih molekula za djelovanje lijekova. U ovom radu je razvijen novi pristup korištenja kvaščevih stanica kako bi se identificirali i okarakterizirali potencijalni ciljni geni bakterije P. aeruginosa PAO-1. Koristeći GatewayTM tehnologiju, zbirka 505 PAO-1 gena, uključenih u esencijalne stanične procese i virulenciju, bila je prebačena u kvaščev vektor koji je sadržavao inducibilan promotor. Nakon transformacije kvasca Saccharomyces cerevisiae, kvaščeve stanice su bile nacijepljene na podlogu na kojoj je bila inducirana ekspresija PAO-1 gena. Koristeći ovaj pristup, selektirana su četiri bakterijska toksina i šest esencijalnih gena kao potencijalne ciljne molekule za djelovanje lijekova. Geni koji su uzrokovali inhibiciju rasta kvaščevih stanica se trenutno koriste u drugom pretraživanju, kako bi se identificirali kemijski spojevi koji mogu revertirati inhibiciju rasta. Ovaj pristup, temeljen na korištenju cijelih kvaščevih stanica će proširiti primjenu "high through-put" tehnika funkcionalne genomike na patogene mikroorganizme kojima se teško eksperimentalno upravlja.

ciljne molekule; inhibicija rasta; "high through-put" tehnologija; Pseudomonas aeruginosa; Saccharomyces cerevisiae

nije evidentirano