hrvatski

Konstrukcija eksperimentalnog sustava za ispitivanje mehanizma popravka dvolančanog loma DNA u bakteriji Escherichia coli

Dvolančani lom u molekuli DNA jedno je od najopasnijih oštećenja koje se može pojaviti u staničnom genomu. Nepopravljeni dvolančani lom može dovesti do gubitka oštećenog kromosoma, a u slučaju nepreciznog popravka može doći do gubitka ili promjene dijela genetičke upute. U ovom radu su konstruirani različiti sojevi bakterije E. coli u kojima je moguće pratiti popravak dvolančanog loma induciranog specifičnom endonukleazom I-Sce I između dviju ponovljenih sekvencija. Da bi se odredila moguća uloga proteina RecA, RecF, RecN, UmuC, UmuD'C (Pol V) i Pol IV konstruirani su sojevi koji, osim eksperimentalnog sustava za indukciju dvolančanog loma, imaju i deletirane odgovarajuće gene. Rezultati ukazuju da je popravak dvolančanog loma između dviju ponovljenih sekvencija znatno manje efikasan u E. coli nego u stanicama eukariota te da je gotovo u potpunosti ovisan o produktu gena recA, a djelomično i o recF.

homologna rekombinacija; popravak dvolančanog loma; RecA; SOS sustav

45/06