Inhibicija kolinesterazâ enantiomerima etopropazina (CROSBI ID 347403)
Ocjenski rad | doktorska disertacija
Podaci o odgovornosti
Šinko, Goran
Simeon, Vera
hrvatski
Inhibicija kolinesterazâ enantiomerima etopropazina
Istraživane su stereoselektivne interakcije acetilkolinesteraze (EC 3.1.1.7) i butirilkolinesteraze (EC 3.1.1.8) sa R- i S- enantiomerima etopropazina (10-(2-dietil- aminopropil) fenotiazin hidroklorida). Enantiomeri su priređeni odjeljivanjem iz racemata primjenom stereoselektivne tekućinske kromatografije i frakcijskom kristalizacijom. Aktivnost butirilkolinesteraze iz seruma konja u odsutnosti i prisutnosti enantiomera etopropazina, mjerena je sa supstratom acetiltiokolinom spektro- fotometrijskom metodom, koja omogućava početak mjerenja aktivnosti unutar nekoliko desetaka milisekundi. Objedinjenim postupkom prilagodbe teoretske krivulje eksperimentalnim vrijednostima određene su konstante za reakciju enzima sa supstratom i reverzibilnu inhibiciju etopropazinom, primjenom tri kinetička modela opisana u literaturi i četiri inačice tih modela. Modeli su se razlikovali po pretpostavljenim molekulskim vrstama, koje nastaju između enzima, supstrata i etopropazina. Konstante inhibicije izračunane iz svih modela pokazale su da je afinitet butirilkolinesteraze za R-enantiomer oko 2, 5 puta veći nego za S-enantiomer u rasponu temperature od 12 do 37 °C. Model, koji pretpostavlja šest parametara za hidrolizu supstrata i dva parametra za inhibiciju enzima, najbolje je pristajao eksperimentalnim podacima. Na mutantima rekombinantne acetilkolinesteraze miša pokazano je da se promjenom strukture aktivnog mjesta enzima stereoselektivnost za enantiomere može povećati (Y337A) ili pak biti obrnutog smjera (Y124Q i W286A) u odnosu na stereoselektivnost butirilkolinesteraze miša, konja i čovjeka. Acetilkolinesteraza miša oko 1600 puta slabije je inhibirana racematom etopropazinom nego butirilkolinesteraza i nije stereoselektivna prema enantiomerima.
kolinesteraze ; etopropazin ; kinetički modeli ; mutanti ; enantiomeri ; metoda zaustavljenog protoka
nije evidentirano
engleski
Inhibition of cholinesterases with ethopropazine enantiomers
nije evidentirano
Cholinesterases ; Ethopropazine ; Kinetic models ; mutants ; enantiomers ; stopped flow method
nije evidentirano
Podaci o izdanju
121
17.02.2007.
obranjeno
Podaci o ustanovi koja je dodijelila akademski stupanj
Prirodoslovno-matematički fakultet, Zagreb
Zagreb