hrvatski

Učinak dušikovih soli na ekspresiju gena u embriogenom tkivu bundeve (Cucurbita pepo L.)

Bundeva je vrsta kod koje je moguće potaknuti proliferaciju embriogenog tkiva na hranidbenoj podlozi MS s dodatkom amonijevih soli kao jedinog izvora dušika. Embriogeno tkivo koje raste na podlozi s manjkom nitratnih iona sastoji se isključivo od preglobularnih i globularnih embrija u kojih je uočeno pojačano nakupljanje kaloze u staničnoj stijenci. Razvoj odvedenijih stadija embrija moguće je samo na hranidbenoj podlozi s dodatkom nitrata. Ispitan je učinak različitih dušikovih soli u hranidbenoj podlozi na ekspresiju nekih gena u embriogenome tkivu bundeve. Izolirana je ukupna RNA iz tkiva linija PEDC, HEC i DEC raslim na različitim hranidbenim podlogama te je primjenom metode RT-PCR analizirana ekspresija gena za fenilalanin-amonij-lijazu (PAL), gena za endohitinazu (CHI) i gena za celuloza sintazu (CSL). Ekspresija gena za gliceraldehid-3-fosfat-dehidrogenazu (GAPDH) praćena je radi kontrole sadržaja cDNA u uzorcima za RT-PCR. Nakon 5 dana kultivacije na svježoj podlozi, najjača ekspresija gena PAL uočena je u embriogenom tkivu raslom na podlozi MSC2, 4-D. Ekspresija gena CHI bila je najjača u tkivu raslom na podlozi MSC, u kojem su uočeni embriji u svim razvojnim stadijima. Manjak nitrata ili dodatak auksina nepovoljno je utjecao na ekspresiju gena CHI. Ekspresija gena CSL bila je približno jednaka u tkivima raslim 5 dana na podlozi MSNH4 i MSC. Auksin 2, 4-D smanjio je ekspresiju gena za celuloza sintazu. Dvanaest sati nakon snabdjevanja nitratima, u embriogenom tkivu prethodno raslom na podlozi s NH4Cl kao jedinim izvorom dušika došlo je do smanjenja ekspresije gena PAL i gena CSL, a do pojačavnja ekspresije gena CHI.

C. pepo; dušik; gen CHI; gen CSL; gen PAL; nitrati; somatska embriogeneza

nije evidentirano