hrvatski

Utjecaj dušikovih spojeva na izlučivanje proteina i topivih fenola u embriogenoj kulturi bundeve (Cucurbita pepo L.)

Istraživanja su provedena s ciljem pojašnjavanja učinka dušikovih soli na razvoj somatskih embrija bundeve. Dosadašnja istraživanja pokazala su da podloga s amonijakom kao jedinim izvorom dušika koči polarni razvoj embrija bundeve te su u tkivu uglavnom zastupljeni globularni embriji. Suprotno tome, podloga s većim udjelom nitrata potiče polarni razvoj embrija te u embriogenom tkivu dominiraju embriji s razvijenim kotiledonima. Ispitan je učinak dušikovih soli na rast, metabolizam i izlučivanje proteina i topivih fenola u kulturama triju embriogenih linija bundeve tijekom 15 dana kultivacije u suspenziji. Kinetika rasta tkiva određena je mjerenjem prirasta svježe i suhe mase tkiva i potrošnje glukoze iz podloge. Podloga s NH4+ kao jedinim izvorom dušika usporavala je rast embriogenog tkiva, a uočeno je i značajno zakiseljavanje podloge tijekom pokusa. Dodatkom MES-a vrijednost pH podloge je stabilizirana, što je potaklo rast tkiva i izlučivanje izvanstaničnih proteina. Razvio se manji postotak globularnih embrija, ali nije došlo do daljnjeg razvoja embrija. Ponovno snabdjevanje nitratima pojačalo je rast embriogenog tkiva, prethodno kultiviranog na podlozi s amonijevim ionima kao jedinim izvorom dušika. Podloga MSCNaNO3 potakla je pojačano izlučivanje proteina i fenola u podlogu. Imunodokazivanjem je utvrđeno prisutstvo proteina 14-3-3 u uzorcima ukupnih staničnih proteina sve tri embriogene linije. Usporednom analizom profila izvanstaničnih proteina, razine glikozilacije i prisutstva izvanstanične endohitinaze EP3 utvrđene su razlike uzokovane sastavom i vrijednosti pH hranidbene podloge.

dinamika rasta; dušikovi spojevi; fenoli; izvanstanični proteini; pH; somatska embriogeneza

nije evidentirano