hrvatski

Monoaminoksidaza: aktivnost izoenzima A i B u mozgu štakora

U radu je razrađena spektrofotofluorimetrijska metoda mjerenja saturacijske kinetike moždanog enzima monoaminoksidaze (MAO) te su određeni kinetički parametri oba njezina izoenzima, A i B, u populaciji štakora. Korišten je nespecifični supstrat, kinuramin, a pojedini izoenzimi su selektivno inhibirani klorgilinom odnosno deprenilom. Fluorescencija nastalog produkta, 4-hidroksikinolina, mjerena je na 310/362 nm. Određeni su optimalni uvjeti za pouzdano mjerenje aktivnosti monoaminoksidaze: raspon koncentracija supstrata, količina proteina u uzorku, vrijeme inkubacije i koncentracije inhibitora. Iz saturacijskih krivulja izračunati su kinetički parametri izoenzima MAO-A (Km = 30 uM, Vmax = 313 nmol produkta/mg proteina/h) i MAO-B (Km = 23, 7 uM, Vmax = 422 nmol produkta/mg proteina/h) u mozgu štakora. Rad sadrži i metodički dio u kojem je za temu "Enzimi" opisan blok-sat nastave kemije i dan prijedlog učeničkog projekta.

deprenil; kinuramin; klorgilin; monoaminoksidaza; spektrofotofluorimetrijska metoda; tkivo mozga

nije evidentirano