hrvatski

Stanična lokalizacija organelne seril-tRNA-sintetaze iz kukuruza

U genomu vrste Zea mays L. (kukuruz) dosad su pronađena dva gena za seril-tRNA-sintetaze. Jedan protein, SerZMc, nema N-terminalni signalni slijed, te vrlo vjerojatno izvršava svoju funkciju u citosolu. Drugi, nazvan SerZMm, ima signalni slijed i ranija istraživanja ukazuju na njegovu lokalizaciju u mitohondrijima i kloroplastima. Ovakva dvojna usmjerenost aminoacil-tRNA-sintetaza je već više puta zabilježena u biljaka. Točnu staničnu lokalizaciju proteina SerZMm utvrdili smo dvjema često upotrebljavanim metodama. Prva je fuzija pretpostavljenog signalnog slijeda s GFP-om (zeleni fluorescentni protein, engl. green fluorescent protein), gdje usmjerenost GFP-a ukazuje na lokalizaciju istraživanog proteina. Druga metoda je western-analiza proteinskih ekstrakata izoliranih mitohondrija i kloroplasta. Specifičnim antitijelima na istraživani protein može se dokazati njegova prisutnost u organelima. Kimerni protein nastao fuzijom prvih 80 aminokiselina proteina SerZMm s GFP-om usmjeren je u kloroplaste i mitohondrije protoplasta kukuruza, a western-analizom je SerZMm bez ikakve dvojbe detektiran u kloroplastima, a možda i u mitohondrijima. Stoga zaključujemo da je SerZMm sasvim sigurno lokaliziran u kloroplastima, a vrlo vjerojatno i u mitohondrijima.

seril-tRNA-sintetaza; GFP-fuzija; stanična lokalizacija proteina; mitohondriji; kloroplasti

nije evidentirano