engleski

Characterization of NIH 3T3 mouse fibroblasts and HL60 human cells transfected with human MDR1 and MRP1 transport proteins

ABC (ATP Binding Cassette) transportni proteini imaju važnu ulogu u adsorpciji, distribuciji i eliminaciji brojnih lijekova i ksenobiotika. Najviše istraživani i toksikološki najvažniji ABC proteini sisavaca su P-glikoprotein (MDR1 ; Pgp) i različiti članovi MRP (Multidrug Resistance-Associated Proteins) porodice. Stoga istraživanje mehanizma njihova djelovanja i modulacije predstavlja nužan korak u farmakološkim i toksikološkim istraživanjima, a različite stanične linije sisavaca (mišje ili humane) su raspoložive u tu svrhu. Međutim, u litreraturi su zabilježene velike razlike u transportnim aktivnostima i ekspresiji odgovarajućih transportnih proteina izmjerenima u istim staničnim linijama. Ključan razlog za ovu nedosljednost može biti činjenica da stanične linije transfecirane s pojedinačnim ABC proteinom od interesa obično nisu analizirane na prisustvo i/ili funkciju drugih ABC transportnih proteina. Glavni cilj ovog istraživanja bila je karakterizacija prisustva i transportne aktivnosti MDR1 i MRP1 transportnih proteina u često korištenih NIH 3T3 mišjih fibroblasta i HL60 stanica promiolitične leukemije čovjeka. Obje stanične linije, roditeljske i stanice transfecirane s MDR1 i MRP1 genom su funkcionalno testirane upotrebom tehnike na mikroploči ili protočnom citometrijom, uz korištenje kalceina-AM ili rodamina 123 kao modelnih fluorescentnih supstrata, te verapamila, ciklosporina A, reversina 205 i MK-571 kao modelnih inhibitora. Osim toga, prisustvo i količina MDR1 i MRP1 mRNA kvantitativno se određivala upotrebom RT-PCR tehnike. Profili ekspresije i transportne aktivnosti navedenih staničnih linija biti će prikazani uz kritički osvrt na značenje dobivenih rezultata za daljnja istraživanja.

ABC transporters; NIH 3T3 cells; HL60 cells

nije evidentirano