hrvatski

Razdvajanje bjelančevina žitarica RP-HPLC metodom

Za analizu bjelančevina žitarica, zbog njihove heterogenosti, slabe topljivosti i tendencije polimerizaciji razvijaju se i primjenjuju nove metode kojima se postiže bolja rezolucija i ponovljivost pri razdvajanju. Širu primjenu našle su elektroforetske i kromatografske metode. Cilj ovog rada je prikazati primjenu visoko djelotvorne tekućinske kromatografije obrnutih faza (RP-HPLC) za razdvajanje bjelančevina žitarica. Ekstrakcija i uvjeti RP-HPLC metode su prilagođeni za razdvajanje rezervnih bjelančevina pšenice (glijadini), ječma (hordeini) i kukuruza (zein). HPLC razdvajanje bjelančevina izvršeno je na C18 koloni (RP) uz gradijentno eluiranje i linearno povećanje koncentracije acetonitrila koji sadrži trifluoroctenu kiselinu, a detekcija pojedinih skupina na 210 nm. Ovom osjetljivom kromatografskom metodom poistignuta je visoka rezolucija i reproducibilnost (C.V.% <3) pri razdvajanju glijadina (&#61537; , &#61559; i &#61543; skupine), hordeina (B, C, i D skupine) i zeina (A i B skupine). Ovi preliminarni rezultati istraživanja su pokazali da se RP-HPLC metoda može primjeniti u genetskim proučavanjima u programima oplemenjivanja i u identifikaciji sorti žitarica.

žitarice; bjelančevine; razdvajanje; tekućinska kromatografija

nije evidentirano