hrvatski

Učinak kolhicina na raspodjelu membranskih proteina epitelnih stanica štakora

Epitelne stanice uspostavljaju, održavaju i modificiraju sadržaj stanične membrane (SM) pomoću endo- i egzocitoze. Ovaj proces, poznat kao recikliranje membrana, ovisi o intaktnim mikrotubulima (MT). Razgradnja MT narušava recikliranje i raspodjelu nekih, ali ne svih, proteina stanične membrane. U ovom radu ispitali smo mogućnost da način ugradnje pojedinog proteina u SM (transmembranski, ekto- i endoproteini) određuje hoće li recikliranje, a time i raspodjela tog proteina, ovisiti o MT. U tu svrhu smo Wistar štakorima ubrizgali kolhicin (0.35 mg/100 g t.t.), te nakon 12 sati promatrali učinak razgradnje MT na raspodjelu membranskih proteina SM u epitelnim stanicama različitih organa (bubrega, epididimisa, tankog crijeva i jetre). Promatrani proteini su u SM ugrađeni kao transmembranski proteini (a1-podjedinica Na/K-ATPaze, stanična adhezijska molekula CAM 105, megalin (gp330)), ektoproteini (karboanhidraza IV (CA IV)) ili endoproteini (podjedinice V-ATPaze od 31 kDa i 56 kDa). Imunoblotiranjem uzoraka tkivnih homogenata utvrdili smo da se količina a-tubulina smanjila u većini ispitanih organa kolhicinom obrađenih štakora.Primjena kolhicina dovela je i do jakog smanjenja endocitoze FITC-dekstrana u stanicama proksimalnih kanalića bubrega. Posredna imunocitokemija je pokazala da je primjena kolhicina dovela do: a) nestanka MT u svim tkivima, osim u tankom crijevu, b) značajnog gubitka podjedinica V-ATPaze od 31 i 56 kDa i megalina iz apikalne stanične membrane i njihove preraspodjele u brojne unutarstanične vezikule, c) nepromijenjene raspodjele CAM 105, a1-pdjedinice Na/K-ATPaze i CA IV. Prema ovim rezultatima zaključujemo da način udruživanja proteina sa staničnom membranom nije važan za raspodjelu proteina ovisnu o MT, te da bi od veće važnosti mogla biti specifična uloga proteina u različitim (pato)fiziološkim stanjima.

epitelne stanice; membranski proteini; mikrotubuli; kolhicin

nije evidentirano