Način testiranja goveđeg mozga na GSE metodom Prionics AG. (CROSBI ID 510045)
Prilog sa skupa u zborniku | stručni rad | domaća recenzija
Podaci o odgovornosti
Bilandžić, Nina ; Mihaljević, Željo ; Ramljak, Sanja ; Šoštarić, Branko
hrvatski
Način testiranja goveđeg mozga na GSE metodom Prionics AG.
U Hrvatskom veterinarskom institutu od 1. svibnja 2001. godine provodi se testiranje goveđe spongiformne encefalopatije (GSE) testom Prionics-Check. Test je odabran na temelju svojih karakteristika koje podupiru ritam i organizaciju hrvatske mesne industrije. Prionics-Check test je imunološki test koji detektira specifične prionske proteine u mozgu i moždini ovaca i stoke. Omogućuje otkrivanje specifične (patološke) izoforme priona, koja se akumulira u mozgu oboljelih životinja, prije pojave kliničkih simptoma GSE. Test se zasniva na enzimskoj digestiji uzoraka mozga proteinazom K pri čemu se normalna forma priona potpuno razori, a patološka izoforma se cijepa na definirani fragment. Rezistentni fragment se separira gel elektroforezom. Nakon prijenosa i blokiranja na membrani provodi se imunološka detekcija specifičnim antitijelima nakon čega slijedi luminiscentna detekcija koja se bilježi na rengenski film. Nastali rezultati vizualno su prikazani u obliku tvz. bandova (mrlja) i uspoređuju se sa negativnom kontrolom odnosno normalnom nedigestiranom formom priona. Od presudne je važnosti pravilno uzorkovanje obex regije medule oblongate mozga jer je dokazano da je najveća koncentracija GSE– specifične izoforme priona u toj regiji. Specifičnost testa je 99.9% što je pokazano uspoređivanjem rezultata sa klasičnom histološkom pretragom ili imunohistokemijom. Istraživanjem je utvrđeno da lažno pozitivni rezultati nastaju eventualno kao posljedica problema u postupku enzimske digestije, a ne kao posljedica loše kvalitete uzorka (autoliza) kao u slučaju primjene ELISA metode. To ukazuje da izvedba testa ne ovisi o kvaliteti tkiva što omogućuje obradu vrlo autolitičnih uzoraka iz udaljenih klaonica. Vremensko trajanje testa je 6 - 8 sati ovisno o količini uzoraka i iskustvu provoditelja testa. Dinamika testa zahtijeva i posebnu organizaciju radnog vremena u svrhu poštovanje procesa proizvodnje mesa. Test je laboratorijski vrlo zahtjevan i treba dobru edukaciju.
GSE; Prionics-Check; goveda
nije evidentirano
engleski
Detection of bovine spongiphorm encephalopatie by Prionics-Check method
nije evidentirano
BSE; Prionics-Check; cattle
nije evidentirano
Podaci o prilogu
38-39-x.
2001.
objavljeno
Podaci o matičnoj publikaciji
Veterinarski dani 2001., Listopad 2001
Balenović, Tomislav
Zagreb: Hrvatska veterinarska komora
Podaci o skupu
Veterinarski dani 2001.
pozvano predavanje
17.10.2001-20.10.2001
Opatija, Hrvatska