Napredna pretraga

Pregled bibliografske jedinice broj: 205778

Uloga gena nm23 u proliferaciji i diferencijaciji stanica in vitro


Herak Bosnar, Maja
Uloga gena nm23 u proliferaciji i diferencijaciji stanica in vitro 2002., doktorska disertacija, Prirodoslovno-matematički fakultet, Zagreb


Naslov
Uloga gena nm23 u proliferaciji i diferencijaciji stanica in vitro
(The role of nm23 in in vitro cell prolifereation and diferentiation)

Autori
Herak Bosnar, Maja

Vrsta, podvrsta i kategorija rada
Ocjenski radovi, doktorska disertacija

Fakultet
Prirodoslovno-matematički fakultet

Mjesto
Zagreb

Datum
10.05

Godina
2002

Stranica
98

Mentor
Pavelić, Jasminka

Ključne riječi
Nm23; zeleni fluorescentni protein; tumori glave i vrata; in vitro; diferencijacija; proliferacija; retinoična kiselina; beta-katenini
(Nm23; green fluorescent protein; head and neck tumors; in vitro; proliferation; diferentiation; retinoic acid; beta-catenins)

Sažetak
Gen nm23 otkriven je u stanicama melanoma miša slabog metastatskog potencijala te se s početka smatralo da se radi o supresoru metastaziranja. U normalnim stanicama proteinski produkt ovog gena ima ulogu nuklozid-difosfat kinaze (NDPK). Funkcionalna NDPK u stanici tvori heksamer sastavljen od dvije posjedinice, Nm23-H1 i Nm23-H2. Od otkrića do danas proteinu Nm23 pripisivalo se još nekoliko funkcija, a i njegova uloga supresora više je puta dovedena u pitanje. Cilj našeg rada bio je rasvijetliti ulogu nm23-H1 i nm23-H2 u tumorima glave i vrata in vitro i njegovu moguću upotrebu u genskom liječenju. U tu svrhu subklonirali smo odsječke cDNA gena nm23-H1, nm23-H2 i mutirani oblik nm23-H1 u reporterski sustav zelenog fluorescentnog proteina (EGFP). Pri ektopičnoj ekspresiji u stanicama HEp-2, CAL 27, CAL 33 i CAL 166 opazili smo fluorescenciju u cijeloj citoplazmi i nekim jezgrama. Proteini GFP-Nm23-H1 i – H2 uvijek kolokaliziraju. Opazili smo, također, intenzivan kolokalizacijski signal s endoplazmatskom mrežicom dok fuzijski proteini samo iznimno kolokaliziraju s elementima staničnog skeleta. Nismo opazili razliku u smještaju egzogenih proteina u stanicama različitog podrijetla i stupnja diferencijacije. Stanice HEp-2 i CAL 33 prolazno transfecirane konstruktima koji nose sense ili anstisense cDNA gena nm23 pokazuju pojačanu proliferativnu aktivnost. Stanice CAL 27 koje konstitutivno eksprimiraju GFP-Nm23-H2 pokazuju pojačanu proliferativnu aktivnost prva dva dana nakon nasađivanja za razliku od klona koji eksprimira GFP-Nm23-H1 i koji počinje proliferirati sa zakašnjenjem. Smatramo da su ove razlike rezultat različite sposobnosti vezivanja za podlogu između ova dva klona. Stanice koje konstitutivno eksprimiraju GFP-Nm23-H1 kao i netransfecirane stanice pokazuju nešto manju osjetljivost na all-trans retinoičnu kiselinu u smislu inhibicije rasta i poticanja diferencijacije. Ovi rezultati pokazuju da nm23 ima ulogu u nastanku i invaziji tumora glave i vrata te da bi upravo pokusi usmjereni k otkrivanju njegovog utjecaja na vezivanje stanice uz podlogu mogli biti značajni. Na temelju sveobuhvatnog znanja o genu nm23 kao i naših vlastitih rezultata zaključujemo da se gen nm23 za sada ne može upotrijebiti kao meta za gensko liječenje.

Izvorni jezik
Hrvatski

Znanstvena područja
Temeljne medicinske znanosti



POVEZANOST RADA


Projekt / tema
0098092

Ustanove
Institut "Ruđer Bošković", Zagreb

Autor s matičnim brojem:
Maja Herak-Bosnar, (202030)

Citiraj ovu publikaciju

Herak Bosnar, Maja
Uloga gena nm23 u proliferaciji i diferencijaciji stanica in vitro 2002., doktorska disertacija, Prirodoslovno-matematički fakultet, Zagreb
Herak Bosnar, M. (2002) 'Uloga gena nm23 u proliferaciji i diferencijaciji stanica in vitro', doktorska disertacija, Prirodoslovno-matematički fakultet, Zagreb.
@phdthesis{phdthesis, author = {Herak Bosnar, M.}, year = {2002}, pages = {98}, keywords = {nm23, green fluorescent protein, head and neck tumors, in vitro, proliferation, diferentiation, retinoic acid, beta-catenins}, title = {The role of nm23 in in vitro cell prolifereation and diferentiation}, keyword = {nm23, green fluorescent protein, head and neck tumors, in vitro, proliferation, diferentiation, retinoic acid, beta-catenins}, publisherplace = {Zagreb} }