hrvatski

Određivanje antioksidativne aktivnosti pomoću analize ubrizgavanjem u protok s biamperometrijskom detekcijom

Epidemiološke studije provedene u posljednjih desetak godina pokazale su da prehrana bogata antioksidansima pomaže u prevenciji malignih, kardiovaskularnih i neurodegenerativnih oboljenja. Posljedica tih saznanja bio je velik porast interesa za razvoj analitičkih metoda određivanja antioksidativne aktivnosti pojedinačnih spojeva te kompleksnih realnih uzoraka, kao što su hrana ili tjelesne tekućine. Postojeće metode određivanja antioksidativne aktivnosti uzorka uglavnom su spektrofotometrijske, a temelje se na mjerenju inhibicije oštećivanja biološkog supstrata u prisutnosti antioksidansa, ili na izravnom mjerenju smanjenja koncentracije stabilnog slobodnog radikala uslijed reakcije s antioksidansom. Velik nedostatak postojećih metoda je dugotrajnost i ručno izvođenje analize, što ih čini nepodesnima za brze i rutinske analize velikog broja uzoraka. U ovom radu prikazan je razvoj elektrokemijske metode određivanja antioksidativne aktivnosti koja se temelji na reakciji antioksidansa s 2, 2'-azinobis(3-etilbenzotiazolin-6-sulfonat) (ABTS) radikal-kationom, te na biamperometrijskom mjerenju smanjenja koncentracije ABTS radikal-kationa na interdigitaliziranoj elektrodi. Da bi se izbjegla potreba za posebnom pripremom reagensa koji sadrži ABTS radikal-kation prije izvođenja analize, te time skratilo ukupno vrijeme potrebno za analizu, ABTS radikal-kation generiran je elektrokemijskom oksidacijiom otopine ABTS-a u protočnoj elektrokemijskoj ćeliji. Primjenom biamperometrijske detekcije ABTS radikal-kationa značajno je povećana selektivnost elektrokemijskog mjerenja u kompleksnim realnim uzorcima koji sadrže velik broj elektroaktivnih komponenata. Integriranjem svih stupnjeva analize (generiranje ABTS radikal-kationa, njegovo miješanje s uzorkom te elektrokemijsku detekciju smanjenja koncentracije ABTS radikal-kationa) u sustav za analizu ubrizgavanjem u protok, dobivena je brza, jednostavna i pouzdana metoda određivanja antioksidativne aktivnosti, koja omogućuje analizu više od 30 uzoraka na sat. Primjenjivost razvijene metode ispitana je određivanjem antioksidativne aktivnosti većeg broja čistih spojeva i realnih uzoraka, pri čemu je postignuto vrlo dobro slaganje s referentnom spektrofotometrijskom TEAC (Trolox Equivalent Antioxidant Capacity) metodom.

Antioksidant; biamperometrija; analiza injektiranjem; ABTS; TEAC

nije evidentirano