Usporedba dviju metoda izolacije genomske DNA iz tumora središnjeg živčanog sustava čovjeka (CROSBI ID 756172)
Druge vrste radova | radovi sa studija
Podaci o odgovornosti
Perić, Jelena
hrvatski
Usporedba dviju metoda izolacije genomske DNA iz tumora središnjeg živčanog sustava čovjeka
Tehnike molekularne biologije omogućuju utvrđivanje nasljednih abnormalnosti i neoplazmatskog rasta stanica. Prvi korak u takvim testovima obično je izolacija DNA visoke molekularne težine iz krvi, koštane srži, tkiva ili kultiviranih jednojezgrenih stanica. Najčešće se koriste neautomatizirane metode, metoda izolacije DNA fenolom i kloroformom, te metoda izolacije DNA isoljavanjem proteina. Iako se izolacija fenolom i kloroformom uglavnom smatra najboljom metodom izolacije DNA, danas se traže zamjene te metode, kojima se izbjegavaju karcinogeni, fenol i kloroform. Kako bih pokazala da je metoda isoljavanjem proteina prihvatljivija, iz 30 sam tumora središnjeg živčanog sustava čovjeka izolirala DNA metodom fenola i klorofoma i metodom isoljavanja proteina, te usporedila uspješnost tih dviju izolacija spektrofotometrijskim mjerenjima koncentracije i čistoće dobivenih uzoraka DNA. Pokazala sam da u 53 % slučajeva metoda fenola i kloroforma daje veću koncentraciju DNA po miligramu korištenog tumorskog tkiva, međutim, kod metode isoljavanjem proteina, ukupna je koncentracija DNA u 500 μ l TE pufera dovoljna za kvalitetan PCR. Metoda izolacije DNA isoljavanjem proteina, s druge strane, u većini uzoraka daje čišću DNA nego metoda fenola i kloroforma. S obzirom na takve podatke, i na činjenicu da metoda izolacije DNA fenolom i klororformom predstavlja za čovjeka i za okoliš veću opasnost, puno dulje traje, napornija je, troši više kemikalija i najvjerojatnije degradira DNA u većoj mjeri, došla sam do zaključka da je izoliranje DNA metodom isoljavanja proteina prihvatljivije od metode fenola i kloroforma.
izolacija genomske DNA; tumori središnjeg živčanog sustava
Voditeljica : doc. dr. sc. Nives Pećina-Šlaus Suvoditeljica : dr. sc. Inga Marijanović
engleski
The comparison of two methods of DNA isolation from human tumors of the central nervous system
nije evidentirano
genomic DNA isolation; central nervous system tumors
nije evidentirano
Podaci o izdanju
Prirodoslovno-matematički fakultet Sveučilišta u Zagrebu
2005.
nije evidentirano
objavljeno