hrvatski

Metode prikupljanja i spremanja uzoraka izmeta vukova (Canis lupus) za genetička istraživanja

Nezaobilazan dio istraživanja i upravljanja divljim životinjama je pronalaženje i identifikacije pojedinačnih jedinki. Istraživanje zvijeri (Carnivora) promatranjem u divljini vrlo je teško, jer su to životinje koje se skrivaju, teško ih je uloviti, a često su i vrlo rijetke. Zato se u istraživanjima takvih vrsta sve češće koriste neinvazivne molekularne tehnike, kao što je analiza uzoraka izmeta. Međutim, DNA izolirane iz takvih uzoraka je vrlo malo i loše je kvalitete, pa je vrlo važno koje metode prikupljanja i spremanja uzoraka se koristi da bi se kasnije uspješno provela genetička analiza. Ovdje prikazujemo istraživanje u kojem procjenjujemo učinkovitost triju metoda spremanja DNA vuka iz uzoraka izmeta vuka (Canis lupus) za genetičku analizu, u ovom slučaju genotipizaciju mikrosatelita. Tijekom prošle godine je na području Gorskog Kotara sakupljeno 9 svježih uzoraka izmeta vukova. Na terenu je svaki uzorak podijeljen na tri dijela koji su stavljeni u 95% etanol, u epruvetu s desikatorom i smrznuti (-200C). DNA je izolirana korištenjem komercijalnog kita, te je provedena genotipizacija na 8 mikrosatelitskih lokusa, što znači da su za svaku metodu spremanja uzoraka provedene 72 lančane reakcije polimerazom (9 uzoraka x 8 lokusa). Uspješno je dobiveno 59 genotipova (82%) iz uzoraka spremljenih u etanol, 43 genotipova (60%) iz uzoraka spremljenih u epruvetu s desikatorom, te samo 41 genotip (57%) iz smrznutih uzoraka. Stoga preporučujemo spremanje uzoraka izmeta vukova u 95% etanol, što je i najpraktičnije na terenu.

vukovi; genetska istraživanja

nije evidentirano