hrvatski

Biotransformacija L-fenilalanina katalizirana oksidazom L-amino kiselina

Oksidaze L-amino kiselina (L-AAO) su poznate po svojoj specifičnosti prema nizu različitih supstrata. U ovom radu je kinetički karakteriziran enzim oksidaza L-amino kiselina, izoliran iz zmijskog otrova kobre roda Crotalus adamanteus. Kao supstrat je korišten L-fenilalanin (L-Phe). L-fenilalanin se u prisustvu enzima L-AAO oksidativno deaminira u odgovarajuću alfa-keto kiselinu (fenilpirogrožđanu kiselinu) uz nastanak vodikovog peroksida i amonijaka kao sporednih produkata. Prisustvo vodikovog peroksida je nepoželjno u reakcijskoj otopini, a za njegovo uklanjanje je korištena katalaza porijeklom iz goveđe jetre. Iz eksperimentalno određene ovisnosti specifične aktivnosti enzima o početnoj koncentraciji supstrata L-fenilalanina, odnosno produkta fenilpirogrožđane kiseline (metoda početnih brzina) nelinearnom regresijom su procijenjeni parametri Michaelis-Menten-ovog izraza, Vm i Km, kao i konstanta inhibicije produktom, Ki. Biotransformacija L-fenilalanina katalizirana oksidazom L-amino kiselina je provedena u šaržnom reaktoru, šaržnom reaktoru bez dodatka katalaze, ponovljivom šaržnom reaktoru, te u protočnom kotlastom enzimskom membranskom reaktoru (EMR). Postavljen je matematički model procesa biotransformacije L-fenilalanina u fenilpirogrožđanu kiselinu kataliziranog oksidazom L-amino kiselina. Parametri modela su procijenjeni simpleks metodom ili metodom najmanjih kvadrata pomoću programskog paketa SCIENTIST. Rezultati simulacije procesa pomoću modela su uspoređeni sa eksperimentalnim rezultatima te je ustanovljeno njihovo dobro slaganje.

oksidaza L-amino kiselina; Crotalus adamanteus; L-fenilalanin; matematički model procesa

nije evidentirano