hrvatski

Inhibicija acetilkolinesteraze i butirilkolinesteraze piridinijevim oksimima 2- PAM i HI-6

Piridin-2-aldoksim-N-metilklorid (2-PAM) i 1- (2-hidroksiiminometil-1-piridinio)-3-(4- karbamoil-1-piridinio)-2-oksapropan diklorid (HI-6) su reverzibilni inhibitori acetilkolinesteraze (EC 3.1.1.7 ; AChE) i butirilkolinesteraze (EC 3.1.1.8 ; BChE). Kada su ti enzimi inhibirani fosforiliranjem serina u njihovom aktivnom mjestu, 2-PAM i HI-6, kao nukleofilni spojevi, mogu biti i reaktivatori tih enzima. Mjerena je reverzibilna inhibicija rekombinantnih enzima miša AChE, BChE i mutanata AChE sa 2-PAM i HI-6. Mutanti aktivnog mjesta bili su ili s promijenjenom aminokiselinom samo u mjestu vezanja kolina (Y337A) ili u kombinaciji s promjenom u acilnom džepu (F295L/Y337A, F297I/Y337A) simulirajući na tim mjestima sastav aminokiselina kakav ima BChE. Cilj je bio vidjeti koje su aminokiseline u aktivnom mjestu uključene u interakciju oksimima. Disocijacijske konstante za reverzibilni kompleks enzima i oksima u aktivnom mjestu (Ki) određene su iz prividnih konstanti disocijacije kao funkcije koncentracije (0.05-1.0 mM) acetiltiokolina, supstrata tih enzima. Disocijacijska konstanta za AChE w.t. iznosi 150 µ ; M za 2-PAM i 47 µ ; M za HI-6, a za BChE w.t. 320 µ ; M za 2-PAM i 23 µ ; M za HI-6. Uvođenjem mutacija u AChE afinitet za oksime postao je manji od onoga što ga imaju AChE i BChE divljega tipa. Ki za Y337A, F295L/Y337A i F297I/Y337A bile su 590, 650 i 1700 µ ; M za 2-PAM, odnosno 87, 108, i 180 µ ; M za HI-6.

Acetilkolinesteraza ; Butirilkolinesteraza ; Oksimi ; Reverzibilna inhibicija

nije evidentirano