hrvatski

Učinak bakterijske metiltransferaze na popravak alkilacijskog oštećenja u mer- stanicama ljudskog glioblastoma

Po osjetljivosti na citotoksične učinke alkilirajućih spojeva tumorske stanice ljudi mogu se podijeliti na Mer- (izrazito osjetljive zbog smanjene ekspresije DNA metiltransferaze, enzima koji popravlja alkilacijska oštećenja) i na Mer+ (otporne jer proizvode DNA metiltransferazu i popravljaju alkilacijsko oštećenje). U Mer- stanicama alkilirajući spoj N-metil-N'-nitro-N-nitrozogvanidin (MNNG) inducira proizvodnju plazminogen aktivatora urokinaznog tipa (uPA), serinske proteaze uključene u procese remodeliranja tkiva i metastaziranje tumora. Mehanizam te indukcije još uvijek nije poznat. Pretpostavljamo da bi indukcija mogla biti posredovana nepopravljenim oštećenjem DNA. Proizveli smo transfektante A8 i A4 eksprimirajući gen ada (bakterijski analog ljudske DNA metiltransferaze) u stanicama ljudskog glioblastoma A1235 Mer- fenotipa. Transfektanti su bili višestruko otporniji na citotoksične učinke MNNG-a. Imali su 3.7, odnosno 3.4 puta manju izvanstaničnu proteolitičku aktivnost u usporedbi sa stanicama A1235. Ispitivali smo i ekspresiju gena upa u stanicama A1235 i A8 nakon izlaganja stanica 5 M MNNG-u. Ekspresija gena upa u oba stanična tipa nije se mijenjala sve do 12. sata. U stanicama A1235, 24 sata nakon tretiranja, razina upa transkripta je bila 4 puta viša, a nakon 48 i 72 sata 6.2 puta viša nego u kontroli. U stanicama A8 24, 48 i 72 sata nakon izlaganja MNNG-u izmjerili smo 2 puta višu razinu upa transkripta od kontrolne, ali 3 puta nižu nego u stanicama A1235. Cikloheksimid dodan zajedno s MNNG-om nije utjecao na indukciju upa. Rezultati su pokazali indukciju gena upa u ljudskim Mer- glioblastoma stanicama nakon tretiranja s MNNG-om. Indukcija gena upa bi dakle, mogla biti stanični odgovor na oštećenje DNA.

operon ada-alkB; mer fenotip; O6-metilgvanin-DNA metiltransferaza; urokinazni tip plazminogen aktivatora

nije evidentirano