hrvatski

Distribucija i organizacija rDNA kromatina u kromosomima i jezgri nekih vrsta roda Quercus i aktivnost 18S-5.8S-26S rDNA lokusa

U identičnim kariotipovima vrsta Q. petraea i Q. robur dva su 18S-5.8S-26S (18S) rDNA lokusa – glavni (NOR-1) i mali (NOR-2) rDNA lokus - smještena na dva različita kromosoma komplementa. Prema intenzitetu hibridizacijskog signala nakon fluorescentne hibridizacije in situ (FISH) utvrđeno je da glavni 18S rDNA lokus sadži puno više kopija rRNA gena od malog lokusa. Upotrebom FISH tehnike s 18S rDNA sondom na metafazne/interfazne kromosome (svjetlosna mikroskopija) te hibridizacije in situ na sekcije tkiva korjenčića (elektronska mikroskopija) studirana je distribucija i organizacija rDNA kromatina unutar glavnog 18S rDNA lokusa, odnosno jezgrice. rDNA kromatin unutar ovog lokusa ograniziran je kao vrlo kondenzirani odnosno slabije kondenzirani, disperzni kromatin. Dva tipa rDNA kromatina mogu se razlikovati nakon FISH-a na metafaznim/interfaznim kromosomima u vidu lokaliziranog FISH signala odnosno točkastog, disperznog FISH signala. Lokalizirani signal, koji odgovara vrlo kondenziranom rDNA kromatinu, nalazi se u proksimalnom i/ili distalnom djelu lokusa, dok je disperzni signal, koji odgovara slabije kondenziranom kromatinu, prisutan u obliku točkica oko jezgrice. Željelo se utvrditi kako su dva tipa rDNA kromatina organizirana unutar jezgrice. U tu je svrhu primijenjena in situ hibridizacija s 18S rDNA sondom na ultra tanke sekcije meristematskog tkiva. Vrlo kondenzirani kromatin utvrđen je izvan jezgrice te asociran s jezgricom. Međutim, fokusi kondenziranog kromatina identificirani su i unutar jezgrice zajedno s mjestima difuznog signala za koji se pretpostavlja da odgovara potpuno dekondenziranoj rDNA. Dekondenzacija je u uskoj vezi s transkripcijskom aktivnosti rRNA gena. Prema tome, u jezgrici ovih vrsta rDNA segmenti koji su sačinjeni od transkripcijski aktivnih gena izmjenjuju se sa rDNA segmentima u kojima su geni transkripcijski neaktivni i heterokromatinizirani. Ovaj rezultat ukazuje da se unutar jezgrice, usprkos uvriježenom mišljenju, može nalaziti i transkripcijski neaktivni heterokromatinizirani rDNA kromatin. FISH na pahitenskim nitima potvrdio je da jezgricu uvijek organizira samo glavni lokus kod obje vrste pa se vjeruje da je mali 18S rDNA lokus transkripcijski neaktivan.

Quercus; FISH

nije evidentirano