hrvatski

Oplodnja in vitro jajnih stanica krava u ciklusu i dobivenih iz klaoničkog materijala

Primjena embriotransfera je povećala reproduktivne potencijale plotkinja i utjecaj genoma majki u uzgoju stoke, skratila genetski interval, povećala broj teladi od genetski vrijednih plotkinja, ubrzala progresivno testiranje bikova, spriječila prijenos nekih zaraznih bolesti te poboljšala kvalitetu stada. Za dobivanje jajnih stanica od živih davatelljica najpogodnija je transvaginalna ultrazvučna aspiracija, a iz klaoničkog materijala s pomoču 18G igle i vakuum pumpe. Transvaginalnu ultrazvučnu aspiraciju smo provodili u dvije krave u ciklusu tijekom osam tjedana. OPU sistem (Pie Medical, Nizozemska) se sastoji od 3 komponente: ultrazvučnog aparata sa sektorskom sondom od 5 i 7, 5 MHz, aspiracijske pumpe i sustava za uvođenje igle za aspiraciju. Davateljice smo sedirali, te nakon relaksacije s epiduralnom anestezijom, punktirali folikule uz pomoć ehografa. Za dobivanje jajnih stanica iz klaoničkog materijala jajnike smo skupljali direktno na liniji klanja te smo ih dopremili u laboratorij u termos boci s fiziološkom otopinom uz dodatak 10% antibiotika zagrijanom na 37&ordm ; C unutar 3 sata od klanja. Aspirirali smo folikule promjera 3-8mm s pomoču 18G igle i vakuum pumpe uz tlak od 40mmHg. Jajne stanice s kompaktnim kumulusom i homogenom ooplazmom stavili smo na dozrijevanje 24-26 sati. Nakon inkubacije na 39&ordm ; C i sa 5% CO2 u zraku i vlagom 80%, dozrele oocite smo oplodili in vitro sa smrznutom/odmrznutom bičjom spermom pripremljenom na gradijentu BoviPure™ -a i uzgajali do desetog dana uzgoja. Broj dobivenih jajnih stanica iz klaoničkog materijala bio je znatno veći. Broj maturiranih oocita bio je između 96, 4% i 100%. Broj oplođenih oocita 48 sati nakon oplodnje iznosio je 70, 5% u jajnih stanica od živih davateljica te 54, 82% u jajnih stanica iz klaoničkog materijala. Daljnjom kultivacijom broj morula/blastocista sedmog dana uzgoja iznosio je 56, 6% za jajne stanice od živih davateljiva i 13, 98% za jajne stanice iz klaoničkog materijala. Desetog dana uzgoja broj izvaljenih blastocista bio je 21, 25% u jajnih stanica od živih davateljica i 4, 28% u jajnih stanica iz klaoničkog materijala.

IVF; OPU; embriotransfer; krava

nije evidentirano