hrvatski

Uloga gena nm23 u diferencijaciji stanica tumora glave i vrata

U dosadašnjim istraživanjima utvrđeno je da protein Nm23 i njegovi homolozi imaju nekoliko uloga u stanici, od kojih je najpoznatija difosfat-kinazna aktivnost. Nadalje, smanjena ekspresija gena nm23 dovodi se u vezu s visokim metastatskim potencijalom nekih tumorskih stanica. Cilj našeg istraživanja bio je rasvijetliti ulogu gena nm23 u diferencijaciji stanica tumora glave i vrata CAL 27. U tu svrhu koristili smo klonove stabilno transfecirane konstruktima pEGFPC1-nm23-H1, pEGFPC1-nm23-H2 i pEGFPC1-nm23-H1H118N (konstrukt, koji nosi točkastu mutaciju u kinaznoj domeni) koji eksprimiraju fuzijski protein GFP-Nm23. Klonove smo zatim obradili induktorom diferencijacije, all-trans retinoičnom kiselinom. Kao biljege diferencijacije stanica tumora glave i vrata koristili smo beta-katenine i E-kadherine, čiju smo ekspresiju odredili uz pomoć metode Western blot, denzitometrijske analize. Klonovi koji eksprimiraju GFP-Nm23-H1 i GFP-nm23-H2 pokazuju pojačanu ekspresiju biljega diferencijacije nakon 72 sata obrade all-trans retinoičnom kiselinom u usporedbi s kontrolom. Može se zaključiti da gen nm23-H1 utječe na diferencijaciju stanica CAL 27, međutim to djelovanje nije povezano s njegovom kinaznom aktivnošću. Slični rezultati dobiveni su i za klonove, koji eksprimiraju fuzijski protein GFP-Nm23-H2, ali to zbog velike standardne devijacije ne možemo sa sigurnošću utvrditi. Prema rezultatima dobivenim analizom Western blot, E-kadherin ne možemo smatrati pouzdanim biljegom diferencijacije stanica korištenih u ovom pokusu.

nm23; CAL 27; tumori glave i vrata; all-trans retinoična kiselina; E-kadherin; beta-katenin; diferencijacija

nije evidentirano