hrvatski

Utjecaj ektopične ekspresije gfp-Nm23-H1 na obrazac ekspresije gena u stanicama tumora glave i vrata

Gen nm23 otkriven je u stanicama melanoma miša slabog metastatskog potencijala te se u početku smatralo da se radi o supresoru metastaziranja. U zdravim stanicama proteinski produkt ovog gena ima ulogu nukleozid-difosfat-kinaze (NDPK), a funkcionalan je u obliku heksamera sastavljenog od dvije podjedinice, Nm23-H1 i Nm23-H2. Proteinu Nm23 pripisano je još nekoliko funkcija vezanih za proliferaciju i diferencijaciju stanica te rast i razvoj organizma. Cilj rada bio je ustanoviti obrazac ekspresije gena u stanicama karcinoma pločastog epitela jezika čovjeka, CAL27, u kulturi koje pojačano izražavaju nm23-H1. Time bi se dobio uvid u ulogu Nm23-H1 u stanici te utjecaj njegove pojačane ekspresije na poznate signalne puteve u stanici. U tu svrhu subklonirani su cjeloviti odsječci cDNA gena Nm23-H1 u vektor koji sadrži gen za zeleni fluorescentni protein (GFP). Dobivenim konstruktom transfecirane su stanice CAL 27 u kulturi te uspostavljeni stabilni klonovi koji konstitutivno eksprimiraju fuzijski protein GFP-nm23-H1. RNA izolirana iz takvih stanica, kao i iz kontrolnih stanica, analizirana je pomoću Affymetrix mikročip tehnologije. Analizom je ustanovljeno da je u stabilnim klonovima GFP-Nm23-H1 pojačano izraženo 138 gena, a 103 gena ima smanjenu ekspresiju. Rezultati će dalje biti analizirani uz pomoć odgovarajuće programske podrške.

fuzijski protein gfp-Nm23-H1; transfekcija; DNA-mikročip

nije evidentirano