hrvatski

Analiza kratkih uzastopnih ponavljanja DNK pri praćenju kimerizma nakon alogene transplantacije koštane srži

Miješani kimerizam (MC) je stanje u kojem su nazočne i primateljeve i davateljeve hematopoetske stanice, a opaža se nakon transplantacije koštane srži (TKS). U prijašnjim istraživanjima koristile su se standardne citogenetske tehhnike, krvne grupe ili metoda RFLP. Međutim, u brojnim slučajevima niti jedna od nabrojenih metoda nije informativna, te se analize kratkih uzastopnih ponavljanja DNK (Short Tandem Repeat – STR) može primjeniti i u praćenju kimerizma nakon TKS. Ovim istraživanjem pratili smo 15 bolesnika nakon TKS, dvanaest bolesnika bilo je podvrgnuto klasičnoj TKS, dok su preostala 3 bolesnika bila u programu minitransplantacije. Uzorci DNK bili su umnoženi lančanom reakcijom polimerazom za 5 STR lokusa (TH01, VWA31, FES/FPS, F13A01, i SE33) i jedan VNTR lokus (D1S80). U slučajevima minitransplantacije testirana su još 4 dodatna lokusa (D1S1656, D12S391, D18S535, te D22S683). PCR produkti su zatim analizirani elektroforezom u automatskom sekvenceru (ALFexpress). Kod svih 15 parova primatelja i davatelja uočene su razlike na barem dva STR lokusa. U većini slučajeva razlika je opažena na lokusu SE33. MC je pronađen kod sva 3 bolesnika u programu minitransplantacije, kod dva primatelja koji su transplantat KS primili od nesrodnog davatelja, te kod jednog bolesnika koji je imao davatelja KS unutar obitelji. Jedini slučaj u kojem je MC imao prognostičku vrijednost bio je kod bolesnika koji je pokazivao potpuni kimerizam do 160-og dana nakon transplantacije kad je uočeno 40% stanica primatelja. Istraživanje je pokazalo da su analiza lokusa STR zbog visoke informativnosti, relativne jednostavnosti i kratkotrajne analize, metoda izbora u praćenju kimerizma nakon TKS.

transplantacija koštane srži; DNK; kimerizam

nije evidentirano