hrvatski

Aktivnost palmitoil-protein tioesteraze 1 u homogenatu leukocita mjerena fluorimetrijskom metodom

Neuronalne ceroidne lipofuscinoze su skupina genetski nasljednih lizosomskih neurodegenerativnih bolesti karakteriziranih unutarstaničnim nakupljanjem skladišnog materijala autofluorescentnog lipopigmenta koji uzrokuje progresivnu neurološku degeneraciju u svim dobnim skupinama. Pripadaju skupini lizosomskih poremećaja skladištenja. Klinički tijek uključuje progresivnu demenciju, napadaje, progresivno zatajenje vida (osim u obliku koji se javlja u odrasloj dobi) te često poremećaje kretanja. Sveukupno gledajući, ovi poremećaji su najčešći uzročnici nasljednih dječjih neurodegenerativnih bolesti i sve se češće prepoznaju u oblicima koji se javljaju kasnije u životu i u odrasloj dobi. Klasična infantilna bolest CLN1 uzrokovana je mutacijama u genu PPT1. To je genetski poremećaj s pojavom simptoma u dobi između 6 i 24 mjeseca, no zabilježene su i kasnije prezentacije CLN1 bolesti, a to su maloljetnička (juvenilna) i rana odrasla (adultna). Simptomi mogu uključivati znakove intelektualnog i motoričkog zaostajanja, uključujući zaostajanje u razvoju, trzanje mišića (mioklonski trzaji) i napadaje. Rana dijagnoza CLN1 (neuronalna ceroidna lipofuscinoza tipa 1) bolesti je presudna kako bi se osigurala optimalna skrb za bolesnike i njihove obitelji. CLN1 bolest je moguće dijagnosticirati mjerenjem aktivnosti enzima PPT1. Ovaj enzim je neophodan za pravilno funkcioniranje lizosoma. Funkcija ove lizosomske tioesteraze je da ukloni masne kiseline vezane tioesterskim vezama na cisteinske ostatke u proteinima. U ovom radu je cilj uvođenje metode za mjerenje aktivnosti enzima palmitoil proteina tioesteraze 1 u uzorcima leukocita zdrave populacije izoliranih iz pune krvi. Koristila se in house fluorimetrijska metoda određivanja aktivnosti enzima palmitoil protein tioesteraze 1 u leukocitima izoliranima iz EDTA pune krvi. Metoda se pokazala dovoljno pouzdanom za primjenu u selektivnoj laboratorijskoj dijagnostici nakon postavljene kliničke sumnje na CLN1. Međutim, kako sama fluorimetrijska metoda ima mnogo ograničenja i nedostataka, kao prva metoda probira preporučuje se metoda mjerenja aktivnosti PPT 1 iz uzorka suhe kapi krvi na filter papiru.

CLN1, PPT1, Battenova bolest

nije evidentirano