hrvatski

Uspostava postupka za određivanje stupnja hemolize

In vivo (intravaskularna) hemoliza je relativno rijetko (1:10 000/100 000), ali životno ugrožavajuće stanje koje, između ostalog, može biti uzrokovano parenteralnom primjenom lijekova. Potencijalne komplikacije uključuju žuticu, hepatosplenomegaliju, tahikardiju, ishemiju miokarda, zatajenje bubrega i respiratorno zatajenje te u konačnici, multiorgansko zatajenje i smrt. Smrtnost može biti visoka, čak do 10 %. Zbog toga je važna procjena hemolitičkog potencijala lijekova tijekom pretkliničke faze ispitivanja lijekova. Cilj ovog rada bio je uspostaviti jednostavnu metodu za procjenu stupnja hemolize. Uzorci krvi tretirani su saponinom, tritonom-X-100 i propilen glikolom kako bi se izazvala hemoliza. Koncentracija hemoglobina određena je metodom s Drabkinovim reagensom te mjerena na dva tipa analizatora: spektrofotometru s kivetama (Cecil-CE 1011) i automatskom čitaču mikrotitarskih pločica (PerkinElmer-VICTOR3 1420 Multilabel Counter). Postotak hemolize izračunat je dijeljenjem apsorbancije uzoraka tretirane krvi s apsorbancijom uzoraka pune krvi. Metoda je praktična i lako primjenjiva, ali nije pogodna za analizu velikog broja uzoraka jer je dugotrajna i zahtjeva precizno pipetiranje. To se djelomično može poboljšati primjenom automatskog čitača mikrotitarskih pločica koji omogućava istovremenu analizu više uzoraka. Još jedan nedostatak je toksičnost Drabkinovog reagensa i štetnost za okoliš. Prednost metode je jeftin reagens i postojanje internacionalnog standarda.

Hemoliza, stupanj hemolize, formulacije lijekova, ekscipijenti, ispitivanja lijekova

nije evidentirano