hrvatski

Uloga inflamasoma, nekroptoze i piroptoze u kroničnoj opstrukcijskoj plućnoj bolesti

Kronična opstrukcijska plućna bolest (KOPB) je bolest karakterizirana nedostatnim protokom zraka kroz pluća. U patogenezi KOPB-a bitnu ulogu imaju oksidacijski stres i upalni procesi, jer do opstrukcije dišnih putova dolazi zbog kronične upale dišnih putova i razaranja parenhima čime se gubi alveolarna povezanost i elastičnost pluća. Patogeneza KOPB-a povezana je s različitim oblicima stanične smrti te štetnim tvarima od kojih se cigaretni dim smatra najopasnijim. Istraživanje je provedeno na 16-HBE bronhijalnim epitelnim stanicama. Ispitano je djelovanje rhHsp70 (0, 3, 1 i 3 μg/mL), LPS-a (0, 1 μg/mL), LTA (1 μg/mL) i CSE-a ( 2, 5 i 15 %) te njihovih kombinacija. Cilj 24 satnog tretiranja bio je utvrditi dolazi li, i u kojim koncentracijama ovih agenasa, do aktivacije NLRP3 inflamasoma, nekroptoze i piroptoze. Aktivacija NLRP3 inflamasoma i upalni odgovor ispitani su određivanjem ekspresije mRNA za NLRP3, kaspazu-1 i upalni citokin IL-1β kvantitativnim PCR-om. Vijabilnost stanica ispitana je određivanjem aktivnosti LDH izlučene u medij iznad stanica, a njihov način umiranja ispitan je određivanjem ekspresije mRNA za kaspazu-1 i IL- 1β, aktivacije proteina RIPK1 i MLKL te ekspresije proteina gasdermina D Western blot analizom. Do pojačane ekspresije mRNA za NLRP3, IL-1β i kaspazu-1 dolazi nakon pojedinačnog tretiranja stanica s rhHsp70, LPS-om i LTA-om te nakon tretiranja CSE-om pojedinačno i u kombinaciji s rhHsp70. To ukazuje na aktivaciju NLRP3 inflamasoma i upalu. Katalitička aktivnost LDH povećana je samo nakon tretiranja s CSE-om i kombinacijama CSE i rhHsp70 što znači da CSE narušava integritet stanične membrane i aktivira staničnu smrt. Povećanje ekspresije mRNA za IL-1β i kaspazu-1 te povećanje ekspresije proteina gasdermina D ukazuju na aktivnost piroptoze. RIPK1 i MLKL eksprimirane su u svim stanicama no do aktivacije MLKL dolazi samo nakon tretiranja s CSE-om pojedinačno i u kombinacijama s rhHsp70 što upućuje na nekroptozu.

KOPB, NLRP3 inflamasom, nekroptoza, piroptoza

nije evidentirano