hrvatski

Koekspresija fluorescentno obilježene GTPaze Rab5A i probe za aktitvne GTPaze Ras u stanicama amebe Dictyostelium discoideum

GTPaza RasG iz amebe Dictyostelium važan je pozitivni regulator makropinocitoze. Aktivnost GTPaze RasG u ovom procesu regulirana je proteinom IqgC koji djeluje kao njezin GAP. IqgC i RasG kolokaliziraju na makropinosomu, međutim RasG s vezikule disocira prije proteina IqgC. GTPaza Rab5A je identificirana kao drugi interaktor proteina IqgC tijekom sazrijevanja endosoma. Kako bismo razjasnili značaj interakcija proteina IqgC i ovih dviju GTPaza, usporedili smo prostorno-vremenske raspodjele GTPaza RasG i Rab5A tijekom makropinocitoze. Konstruirali smo ekstrakromosomalni vektor koji omogućuje koekspresiju fluorescentno obilježenog Rab5A i probe za aktivni Ras te promatrali njihovu lokalizaciju u živim stanicama koristeći konfokalnu mikroskopiju. Aktivni Ras i Rab5A pokazali su obrnutu dinamiku regrutacije na makropinosomu. Intenzitet Rab5A ubrzano se pojačava nakon zatvaranja makropinosoma, istovremeno kako Ras nestaje. Međutim, obje GTPaze su na makropinosomu prisutne značajni vremenski period, što upućuje na mogući utjecaj Rab5A na Ras putem proteina IqgC.

Ras, Rab5A, IqgC, makropinocitoza, Dictyostelium

nije evidentirano