hrvatski

Elektroforetska karakterizacija Amano lipaza podrijetlom iz bakterija Burkholderia cepacia i Pseudomonas fluorescens

Cilj ovog završnog rada bio je elektroforetski karakterizirati komercijalno dostupne Amano lipaze podrijetlom iz bakterija Burkholderia cepacia i Pseudomonas fluorescens. Za određivanje izoelektrične točke lipaza korišteno je izoelektrično fokusiranje, a molekulske mase poludenaturacijska poliakrilamid gel elektroforeza u prisutnosti natrijeva dodecil sulfata (SDS- PAGE). Proteinske vrpce detektirane su bojanjem srebrom, a aktivnost lipaza u gelu zimografijom. Rezultati su pokazali da komercijalno dostupni pripravci lipaza nisu u potpunosti čisti, nego su uz lipaze prisutni i drugi proteini. Zimografijom je po provedenom izoelektričnom fokusiranju utvrđeno da se komercijalni pripravci sastoje on nekoliko različitih izoenzima lipaza, što je dodatno potvrđeno zimografijom po provedenoj poludenaturacijskoj SDS-PAGE gdje su detektirane lipaze pokazivale jednu veliku proteinsku vrpcu aktivnosti. Izoelektrična točka izoenzima lipaze podrijetlom iz Burkholderia cepacia nalazi se u području pH od 5, 85 do 6, 85, a lipaze podrijetlom iz Pseudomonas fluorescens u području pH od 5, 85 do 7, 35. Molekulska masa lipaze podrijetlom iz Burkholderia cepacia iznosi 27 kDa, a lipaze iz Pseudomonas fluorescens iznosi 23 kDa.

lipaza ; Burkholderia cepacia ; Pseudomonas fluorescens ; izoelektrično fokusiranje ; poludenaturacijska SDS-PAGE ; izoelektrična točka ; molekulska masa

nije evidentirano