hrvatski

Arilesterazna aktivnost paraoksonaze 1 u uzorku seruma, EDTA, citratne i heparinske plazme

Uvod: Humana serumska paraoksonaza 1 (PON1) je kalcij ovisan enzim koji se sintetizira u jetri, a u krvi je vezan za HDL. Zbog antiaterogenog i antioksidacijskog djelovanja sve se više istražuje u kliničkim i epidemiološkim ispitivanjima. Arilesterazna aktivnost PON1 (ARE) određuje se pomoću supstrata fenilacetata i to najčešće iz uzorka seruma. Cilj ispitivanja bio je odrediti može li neki drugi uzorak osim seruma biti prikladan za određivanje ARE. Materijali i metode: ARE je određena kontinuiranim spektofotometrijskim mjerenjem oslobođenog fenola iz fenilacetata na 270 nm. Enzimska aktivnost mjerena je u uzorcima plazme (uzete na antikoagulanse EDTA, citrat i heparin) i u uzorku seruma 10 zdravih dobrovoljaca. Statistička obrada podataka provedena je statističkim programskim paketom SigmaStat 3.0 za Windows. Rezultati: Kruskall- Wallisov test pokazao je statistički značajnu razliku (P<0, 001) između ispitivanih uzoraka. Post hock test (Dunnova metoda ; usporedba prema serumu) pokazao je da je ARE u uzorku EDTA plazme značajno niža 43, 66 (35, 95 – 47, 87) kU/L u odnosu na uzorak seruma 91, 63 (83, 25 – 110, 22) kU/L. ARE je u uzorku citratne plazme niža 73, 98 (70, 86 – 108, 33) kU/L, a u uzorku heparinske plazme viša 95, 08 (85, 15 – 124, 22) kU/L u odnosu na serum, ali razlika nije bila statistički značajna. Odstupanje izmjerene aktivnosti u odnosu na uzorak seruma je -52 % (BIAS -54, 061) za EDTA plazmu, -19 % (BIAS -14, 228) za citratnu plazmu i +4 % (BIAS +3, 234) za heparinsku plazmu. Zaključak: Ispitivanje je pokazalo da uzorak EDTA plazme nije uzorak izbora za određivanje ARE jer EDTA veže kalcij koji je važan za aktivnost PON1. U uzorku citratne plazme enzimska aktivnost PON1 je snižena u odnosu na serum, ali ne statistički značajno te se takav uzorak može koristiti za određivanje ARE. Osim seruma najpouzdaniji je uzorak u kojem se koristi heparin kao antikoagulans jer daje najmanja odstupanja vrijednosti enzimske aktivnosti PON1 u odnosu na serum.

arilesterazna aktivnost ; paraoksonaza 1 ; predanalitika

nije evidentirano

engleski

Arylesterase activity of paraoxonase 1 in serum, EDTA, citrate and heparin plasma

Uvod: Humana serumska paraoksonaza 1 (PON1) je kalcij ovisan enzim koji se sintetizira u jetri, a u krvi je vezan za HDL. Zbog antiaterogenog i antioksidacijskog djelovanja sve se više istražuje u kliničkim i epidemiološkim ispitivanjima. Arilesterazna aktivnost PON1 (ARE) određuje se pomoću supstrata fenilacetata i to najčešće iz uzorka seruma. Cilj ispitivanja bio je odrediti može li neki drugi uzorak osim seruma biti prikladan za određivanje ARE. Materijali i metode: ARE je određena kontinuiranim spektofotometrijskim mjerenjem oslobođenog fenola iz fenilacetata na 270 nm. Enzimska aktivnost mjerena je u uzorcima plazme (uzete na antikoagulanse EDTA, citrat i heparin) i u uzorku seruma 10 zdravih dobrovoljaca. Statistička obrada podataka provedena je statističkim programskim paketom SigmaStat 3.0 za Windows. Rezultati: Kruskall- Wallisov test pokazao je statistički značajnu razliku (P<0, 001) između ispitivanih uzoraka. Post hock test (Dunnova metoda ; usporedba prema serumu) pokazao je da je ARE u uzorku EDTA plazme značajno niža 43, 66 (35, 95 – 47, 87) kU/L u odnosu na uzorak seruma 91, 63 (83, 25 – 110, 22) kU/L. ARE je u uzorku citratne plazme niža 73, 98 (70, 86 – 108, 33) kU/L, a u uzorku heparinske plazme viša 95, 08 (85, 15 – 124, 22) kU/L u odnosu na serum, ali razlika nije bila statistički značajna. Odstupanje izmjerene aktivnosti u odnosu na uzorak seruma je -52 % (BIAS -54, 061) za EDTA plazmu, -19 % (BIAS -14, 228) za citratnu plazmu i +4 % (BIAS +3, 234) za heparinsku plazmu. Zaključak: Ispitivanje je pokazalo da uzorak EDTA plazme nije uzorak izbora za određivanje ARE jer EDTA veže kalcij koji je važan za aktivnost PON1. U uzorku citratne plazme enzimska aktivnost PON1 je snižena u odnosu na serum, ali ne statistički značajno te se takav uzorak može koristiti za određivanje ARE. Osim seruma najpouzdaniji je uzorak u kojem se koristi heparin kao antikoagulans jer daje najmanja odstupanja vrijednosti enzimske aktivnosti PON1 u odnosu na serum.

arylesterase activity ; paraoxonase 1 ; preanalytics

nije evidentirano