hrvatski

Uspostava ovčjeg eksperimentalnog modela kao preduvjet za istraživanje farmakokinetike bioterapeutika

Prilikom otrovanja venomi se u tijelo žrtve unose s.c. ili, rjeđe, i.m. putem nakon čega se oslobađaju u intersticijski prostor te apsorpcijskim procesom, putem krvnih i/ili limfnih kapilara, dospijevaju u krvotok. Venomi zmija iz porodice Viperidae najvećim dijelom se apsorbiraju putem limfnog sustava koji služi kao izvor za njihovu kontinuiranu dostavu u sistemsku cirkulaciju. Parenteralna primjena antivenoma je okosnica terapije otrovanja izazvanih zmijskim ugrizom. Prevladava mišljenje da njihova primjena i.m. putem ne predstavlja optimalan izbor za uspješno liječenje otrovanja te se preporuča i.v. terapijski princip kao primjereniji za usklađivanje farmakokinetičkog profila antivenoma s onim ciljnog venoma, a koji je dugi niz godina bio praćen isključivo u sistemskoj cirkulaciji. Međutim, nedavno je pokazano da bi neutralizacija venoma u limfnom sustavu također mogla biti važna za klinički ishod. Stoga se nametnula potreba za preispitivanjem prednosti i mana i.v., odnosno i.m. primijenjenog antivenoma praćenjem njegovog utjecaja na razinu venoma u oba relevantna tjelesna sustava. Cilj istraživanja je bio na ukupno četiri ovce uspostaviti animalni model kako bi se razvijene procedure i kirurške tehnike za biološko uzorkovanje krvi i limfe, u idućoj fazi, mogle implementirati u studiju farmakokinetike na eksperimentalno otrovanim i liječenim životinjama. Kao netoksični, modelni protein je korišten ovalbumin potkožno apliciran u dozi koja odgovara količini venoma injektiranoj u tipičnom otrovanju. Krv je prikupljana iz jugularne vene, a limfa kontinuiranim dreniranjem iz prsnog limfovoda. Razvijen je ELISA test za kvantifikaciju ovalbumina, potvrđeno je da je aplicirana doza dostatna za pojavu mjerljivih koncentracija u sistemskoj i limfnoj cirkulaciji te je definiran optimalni protokol uzorkovanja za pouzdan izračun farmakokinetičkih parametara. Razdoblje od 14 dana bilo je dovoljno za uzorkovanje seruma. Za dvije životinje određeno je poluvrijeme eliminacije (22, 9 h i 59, 7 h), volumen distribucije (94, 8 L i 144, 7 L) i klirens (47, 7 mL/min i 28, 5 mL/min). Limfu, u kojoj je oporavljeno 11% primijenjene doze, treba uzorkovati najmanje 4 h kako bi se postigao plato apsorpcije.

otrov, protuotrov, ovalbumin, ovca, krv, limfa, ELISA test, farmakokinetika

nije evidentirano