hrvatski

Ispitivanje utjecaja mutacija u ciljanoj regiji gena SCW4 na sposobnost kovalentnog vezanja proteina Scw4 u staničnu stijenku kvasca

Scw4 protein jedan je od najzastupljenijih proteina u staničnoj stijenci Saccharomyces cerevisiae. U staničnu stijenku veže se kovalentnim i nekovalentnim vezama, no sama priroda te kovalentne veze još uvijek nije poznata. Kako bi se otkrilo koja je regija odgovorna za njegovo kovalentno vezanje, provedeno je istraživanje u kojemu je mutacija uvedena u regiju koja je po svom aminokiselinskom slijedu slična onoj koja se nalazi u Pir proteinima, tzv. V regija. Kvasci su uzgojeni na selektivnim podlogama pri različitim pH vrijednostima, pH 4 i 7. Proteini stanične stijenke su zatim izolirani tretmanom stijenki vrućim SDS-om, odnosno 30 mM NaOH, čime su izolirani nekovalentno vezani odnosno kovalentno vezani proteini. Analiza proteinskih ekstrakata provedena je SDS gel elektroforezom i Western blotom. Iz dobivenih rezultata vidljivo je kako je V regija odgovorna za stvaranje kovalentne veze proteina Scw4 sa glukanom stanične stijenke. U daljnjim istraživanjima potrebno je utvrditi preko koje se aminokiseline unutar te regije ostvaruje kovalentna veza.

japsinske proteaze, Kex2 proteaza, Saccharomyces cerevisiae, Scw4

nije evidentirano