hrvatski

Usporedba postupaka izdvajanja DNA iz pera u kontroli cijepljenja pilenki lake pasmine kokoši sojem CVI 988 virusa Marekove bolesti

Marekova bolest je jedna od najraširenijih bolesti domaće kokoši koja dovodi do značajnih proizvodnih gubitaka. Bolest uzrokuje alfa-herpes virus (rod Mardivirus) koji dovodi do promjena na živcima i visceralnim organima u vidu infiltracije pleomorfnim limfnim stanicama. Uz navedeno, važan segment u patogenezi ove bolesti je i izrazita imunosupresija uslijed destrukcije važnih imunokompetentnih stanica, T i B limfocita. U cilju kontrole i suzbijanja Marekove bolesti potrebno je provođenje principa stroge biosigurnosti s naglaskom na tehnologiju proizvodnje, korištenje genetski rezistentnih linija kokoši, a najvažniju ulogu ima cijepljenje. Imunoprofilaksa i bolja kontrola Marekove bolesti se postiže primjenom cjepiva od atenuiranog serotipa 1 soja CVI988. Također, kontinuiranom molekularnom dijagnostikom poput qPCR, potrebno je provoditi monitoring procijepljenosti i pojavnosti bolesti kako bi se pratila učinkovitost cijepljenja i moguće probijanje zaštite. Cilj ovog istraživanja je usporedba dvije metode izdvajanja DNA iz badrljice pera u praćenju procijepljenosti jata sojem CVI988 virusa Marekove bolesti primjenom qPCR molekularne metode. U radu je uspoređena metoda izdvajanja DNA natrijevom lužinom u odnosu na komercijalni kit. Ukupna DNA izdvojena je usporedno iz 12 uzoraka pera primjenom obje metode izdvajanja, a potom pretražena istovremeno qPCR reakcijom primjenom početnica za dokaz specifičnog odsječka genoma cijepnog soja CVI 988 virusa Marekove bolesti. Rezultati pokazuju gotovo statistički značajnu razliku u učinkovitosti izdvajanja DNA između korištenih metoda u korist primjene lužine. Također, svi uzorci jata su pozitivni, čime možemo potvrditi procjepljenost atenuiranim serotipom 1, sojem CVI988. Navedeni rezultati nam pokazuju mogućnost učinkovite izolacije DNA jednostavnom metodom pomoću natrijeve lužine, uz brži i jednostavniji postupak izdvajanja i bolje postignute rezultate. Primjenom navedenog postupka možemo provesti brzu i jednostavnu kontrolu provedene imunoprofilakse na farmama nakon primjene cjepiva od soja CVI988 virusa Marekove bolesti.

Marekova bolest ; kokoš ; cijepljenje ; CVI 988 ; DNA ; pero ; qPCR

nije evidentirano