hrvatski

UČINAK RAZLIČITIH NANOČESTICA SREBRA NA HEMOSTAZU

Cilj istraživanja: Zbog svoga biocidnoga djelovanja, najviše upotrebljavane nanočestice u medicini su nanočestice srebra (nanoAg). S obzirom na nedostatak spoznaja o njihovim učincima na hemostazu, cilj ovoga istraživanja bio je ispitati učinke nanoAg-a ovisno o njihovoj površinskoj funkcionalizaciji. Nacrt studije: In vitro studija na uzorcima krvi dobivenim od dobrovoljnih zdravih davatelja koji su tretirani s različitim vrstama nanoAg-a. Svaki pokus je uključivao negativnu kontrolu prema kojoj su rezultati normalizirani. Materijal i metode: Sintetizirani su nanoAg-i s različitim stabilizacijskim omotačima: natrijevim bis(2-etilheksil)sulfosukcinatom (AOT), polivinilpirolidonom (PVP), poli-L-lizinom (PLL) i goveđim serumskim albuminom (BSA). Karakterizacija nanoAg-a napravljena je s DLS-om, ELS -om i TEM- om. Na uzorcima krvi zdravih dobrovoljaca ispitani su hemolitički učinci nanoAg-a Drabkinovom metodom, agregacija trombocita sa i bez agonista metodom impedancijske agregometrije, koagulacija plazme PV-om, APTV-om i TV-om, i analizirano je stvaranje trombina u plazmi TGT-om. Učinci nanoAg- a na viskoelastična svojstva pune krvi tijekom zgrušavanja ispitana su tromboelastometrijom. Ulazak nanoAg-a u trombocite vizualiziran je TEM- om i metodom protočne citometrije (PCM) mjerenjem bočnog rasapa svjetla. Citotoksičnost i oksidativni stres ispitani su fluorometrijski. Izražaj aktivacijskih biljega na trombocitima (P- selektin i PAC-1) određen je metodom PCM. Rezultati: Sve vrste nanoAg-a izazivaju hemolizu ovisno o dozi. Najintenzivniju hemolizu izazivaju PLL-nanoAg, vjerojatno zbog njihovoga pozitivnoga naboja koji omogućuje jaču interakciju s membranom eritrocita. PLL-nanoAg pokazuju antikoagulantna svojstva u svim testovima osim u testu agregacije trombocita bez agonista. Ostale nanoAg (PVP- nanoAg, AOT- nanoAg i BSA-nanoAg) pokazuju antikoagulantno svojstvo samo u nekim testovima u plazmi, ali u testovima provedenim u punoj krvi pokazuju prokoagulantno djelovanje. Rezultati ispitivanja interakcija nanoAg-a s trombocitima pokazali su da su sve vrste citotoksične, da ulaze u stanice te da izazivaju blagi oksidativni stres i blagu aktivaciju trombocita tijekom 30 minuta. Najtoksičnije djelovanje je potvrđeno kod PLL- nanoAg vrste. Zaključak: Učinci nanoAg-a na hemostazu, trombocite i eritrocite razlikuju se ovisno o površinskoj funkcionalizaciji. Učinci na hemostazu nisu jednoznačni te zahtijevaju uporabu više različitih metoda, standardizaciju metoda, vrste uzorka i predanalitičkih uvjeta

nanočestice srebra ; površinska funkcionalizacija ; hemostaza, agregacija trombocita ; citotoksičnost ; nanomedicina

nije evidentirano