Ciljana mutageneza ljudskog elongacijskog faktora-2 i konstrukcija staničnih linija otpornih na difterijski toksin (CROSBI ID 336761)
Ocjenski rad | magistarski rad (mr. sc. i mr. art.)
Podaci o odgovornosti
Ivanković, Milena
Brdar, Branko
hrvatski
Ciljana mutageneza ljudskog elongacijskog faktora-2 i konstrukcija staničnih linija otpornih na difterijski toksin
Eukariotski elongacijski faktor-2 (EF-2) sudjeluje u translaciji proteina. U procesu elongacije peptidnog lanca katalizira GTP ovisnu translokaciju peptidil-tRNA s aminokiselinskog na peptidilno mjesto ribosoma. EF-2 sadrži jedinstven postranslacijski modificiran histidinski ostatak, diftamid 2-(karboksiamido-trimetilamonio-propil)-histidin. Diftamid se u aminokiselinskom slijedu normalnog ljudskog EF-2 nalazi na poziciji 715. Kod eukariota, difterijski toksin (DT) ADP-ribozilira diftamid i tako inaktivira EF-2, zaustavlja sintezu proteina i izaziva smrt stanice. Zamjenom His715 s jednom od četiri druge aminokiseline: leucinom (L), metioninom (M), asparaginom (N) ili glutaminom (Q) konstruirali smo četiri različita oblika ljudskog EF-2 rezistentnog na DT, metodom ciljane mutageneze. Mutirane oblike EF-2 klonirali smo u ekspresijski vektor pCMVexSVneo, unijeli ga u HeLa CD4 stanice transfekcijom i izolirali rezistentne stanične klonove HeLa CD4/EF-2 (L, M, N i Q) selekcijom u difterijskom toksinu. Ove bi stanice mogle poslužiti za uzgoj modificiranih viriona HIV-a koji kodiraju A fragment difterijskog toksina (DT-A).
elongacijski faktor-2 (EF-2); difterijski toksin (DT); ciljana mutageneza; stanične linije rezistentne na DT.
nije evidentirano
engleski
Site-specific mutagenesis of human elongation factor-2 (EF-2) and construction of diphtheria toxin resistant cell lines
nije evidentirano
elongation factor-2 (EF-2); diphtheria toxin (DT); site-specific mutagenesis; DT resistant cell lines.
nije evidentirano
Podaci o izdanju
66
14.04.2003.
obranjeno
Podaci o ustanovi koja je dodijelila akademski stupanj
Prirodoslovno-matematički fakultet, Zagreb
Zagreb