hrvatski

Razvoj kromatografske metode i optimizacija pripreme biološkog uzorka kao preduvjet terapijskom praćenju lijekova za rak dojke

Ribociklib u kombinaciji s letrozolom ili anastrozolom pokazuje veliku učinkovitost u liječenju uznapredovalog HR+, HER2- raka dojke kod žena u menopauzi, no varijabilnost odgovora na terapiju između pacijenata predstavlja nezanemarivi nedostatak. Terapijsko praćenje navedenih lijekova (engl. therapeutic drug monitoring, TDM) moglo bi uvelike poboljšati ishode terapije te smanjiti incidenciju nuspojava. Preduvjet za uspješno TDM je postojanje odgovarajuće bioanalitičke metode. U analizi bioloških uzoraka zbog niskih koncentracija analita i složenog matriksa ključna je pravilna priprema uzorka. U ovom radu razvijena je metoda tekućinske kromatografije visoke djelotvornosti (engl. high performance liquid chromatography, HPLC) koja omogućuje simultanu analizu odabranih lijekova te su istražene mogućnosti pripreme biološkog uzorka. Ispitani su najpovoljniji uvjeti taloženja proteina te je razvijena i optimizirana metoda disperzivne mikroekstrakcije tekuće-tekuće (engl. dispersive liquid-liquid microextraction, DLLME). U razvoju HPLC metode određena je najprikladnija stacionarna faza i optimalni sastav pokretne faze te uvjeti gradijentne eluacije. U svrhu pripreme uzorka, za taloženje proteina ispitana su različita sredstva i potrebni volumeni s fokusom na učinkovitost pročišćavanja uzorka i dobivanja visokih prinosa. Za daljnju pripremu optimiziran je postupak DLLME. Ispitani su različiti načini izvedbe DLLME uz odabir ekstrakcijskog i disperzivnog sredstva. Kako bi se postupak maksimalno pojednostavnio i očuvali se što viši ekstrakcijski prinosi, ispitani su optimalni volumeni sastavnica za uspješnu DLLME, uzimajući u obzir korištenje što manjih volumena organskih otapala i uzorka. Još su određeni pomoćni uvjeti što uključuje DLLME potpomognutu isoljavanjem i soniciranjem te polazni pH. Ispitan je njihov utjecaj na ekstrakcijske prinose, robusnost tehnike i stabilnost analita. Dobiveni rezultati pružaju uvid u utjecaj određenih parametara na učinkovitost DLLME, a zajedno s razvijenom HPLC metodom postavljaju temelje za daljnji razvoj bioanalitičke metode u svrhu TDM, koji prelazi okvire ovog istraživanja.

terapijsko praćenje lijekova ; tekućinska kromatografija visoke djelotvornosti ; priprema biološkog uzorka ; disperzivna mikroekstrakcija tekuće-tekuće

nije evidentirano