hrvatski

Analiza očuvanosti makromolekula u arhivskim uzorcima makrozoobentosa

Makrozoobentos kao dobar model utjecaja urbanizacije na bioraznolikost slatkovodnih sustava istražuje se desetljećima na morfološkoj razini. Razvojem molekularnih metoda postaje moguće analizirati promjene na razini makromolekula koje nastaju kao posljedice okolišnih utjecaja. Postojanje arhivskih zbirki uzoraka makrozoobentosa otvara mogućnost istraživanja utjecaja urbanizacije na bioraznolikost vodenih staništa kroz vrijeme. Molekularne metode omogućuju potvrđivanje vrsta barkodiranjem, određivanje promjene ekspresije specifičnih gena i detekciju promjene signalnih puteva. U tu svrhu potrebno je utvrditi očuvanost molekula DNA, RNA i proteina, osobito imajući na umu da je većina arhivskih uzoraka fiksirana formalinom i/ili 70%- tnim etanolom. Stoga je cilj ovoga istraživanja bio analizirati očuvanost makromolekula uzoraka makrozoobentosa fiksiranih u formalinu i/ili 70%-tnom etanolom iz zbirki sakupljenih 1992., 2008., 2016. godine. Analizirano je 5 jedinki 2 dominantne vrste nađene u svakoj godini. U istraživanje su uvršteni uzorci, sakupljani na istim urbanim potocima (Veliki potok/Črnomerec i Kašina) u tri navedene godine. Arhivski uzorci uklopljeni su u parafinske kocke čiji su rezovi korišteni za izolaciju molekula DNA i RNA i detekciju proteina. Osim očuvanosti makromolekula potrebnih za molekularne analize procijenjena je i kvaliteta tkiva potrebna za morfometrijske analize. Rezultati su pokazali da očuvanost uzorka u najvećoj mjeri ovisi o postupcima pohrane odmah nakon uzorkovanja. Dobiveni rezultati poslužit će za procjenu mogućnosti korištenja arhivskih zbirki makrozoobentosa u longitudinalnim istraživanjima promjena bioraznolikosti.

arhivski uzorci ; makrozoobentos, očuvanost makromolekula

nije evidentirano