hrvatski

Razvoj metode za analizu adenozin-fosfata iz ljudske krvi

Adenozin-fosfati su organske molekule iz skupine nukleotida, u koje se ubrajaju adenozin-5'- trifosfat (ATP), adenozin-5'-difosfat (ADP) i adenozin-5'-monofosfat (AMP). Kvantitativno određivanje adenozin-fosfata ima izraženu dijagnostičku ulogu jer se utjecaj koncentracije adenozin-fosfata na brojna fiziološka stanja izravno korelira s homeostazom organizma, primjerice energetski naboj. Iz navedenih je razloga cilj ovog istraživanja bio razviti široko primjenjivu, točnu i preciznu metodu ekstrakcije adenozin-fosfata iz malog volumena kapilarne krvi. Za postizanje navedenog cilja, uz originalni znanstveni doprinos, bilo je neophodno ispitati vezanje adenozin-fosfata na aktivni ugljen adsoprcijskom kromatografijom u svrhu pročišćavanja krvnih uzoraka mikro-ekstrakcijom na čvrstoj fazi. Aktivni ugljen se učestalo koristi kao afinitetni adsorbens u cijelom nizu farmaceutskih, medicinskih i bioloških aplikacija zbog svoje široke dostupnosti, velike aktivne površine u odnosu na masu i jedinstvenih bioloških i fizikalno-kemijskih svojstava. Bilo je neophodno razviti i validirati metodu mikro-ekstrakcije putem tekućinske kromatografije obrnutih faza, koja odjeljuje, detektira i kvantificira adenozin- fosfate ekstrahirane iz uzorka kapilarne krvi. Analizirane koncentracije adenozin-fosfata iz krvi odgovaraju teorijskim vrijednostima pronađenim u literaturnim izvorima, što ukazuje na pouzdanost razvijene ekstrakcijske metode. Shodno do sada navedenom, aktivni ugljen selektivno veže adenozin-fosfate te ponovljivo pročišćava uzorak krvi, a pri tome kromatografski parametri linearno, selektivno i precizno odjeljuju navedene analite.

Adenozin-fosfati ; Energetski naboj ; Aktivni ugljen ; micro-SPE ; HPLC

nije evidentirano